Caratteristiche del microscopio a campo scuro, parti, funzioni

Lui microscopio a campo scuro È uno strumento ottico speciale utilizzato in alcuni laboratori. Questo è il risultato di una modifica apportata alla microscopia a campo chiaro. La microscopia a campo scuro può essere ottenuta mediante trans-iluminazione o epi-iluminazione.

Il primo si basa sui raggi di luce che raggiungono direttamente il condensatore, attraverso l'uso di dispositivi che vengono portati prima che i raggi della luce arrivino al condensatore.

Microscopio/ treponemi di campo scuro visto nei microscopi a campo scuro. Fonte: Dietzel65 [CC BY-SA 3.0 (https: // creativeCommons.Org/licenze/by-sa/3.0)]/Judith Miklossy, Sandor Kasas, Anne D Zurn, Sherman McCall, Sheng Yu e Patrick L McGeer [CC di 2.0 (https: // creativeCommons.Org/licenze/by/2.0)]

Il campo scuro con luce trasmessa consente di evidenziare le strutture, essendo in grado di osservare particelle estremamente sottili. Le strutture sono osservate con un po 'di referenza o luminosità in uno sfondo scuro.

Mentre l'effetto epi-iluminazione si ottiene con incidente o luce obliqua. In questo caso il microscopio deve essere dotato di un filtro a mezzaluna speciale nella forma.

Con l'illuminazione incidente, le strutture osservate sono caratterizzate presentando un effetto visivo ad alto rilievo. Questa proprietà consente di evidenziare i bordi delle particelle sospese.

A differenza della microscopia a campo chiaro, il campo scuro è particolarmente utile per la visualizzazione dei preparati affreschi che contengono particelle sospese, senza alcuna colorazione.

Tuttavia, ha diversi svantaggi, incluso che non può essere utilizzato per preparati a secco o preparativi tinti. Non ha una buona risoluzione. Oltre a garantire una buona immagine, l'apertura numerica degli obiettivi non può superare quella del condensatore.

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Caratteristiche

La composizione del microscopio a campo oscuro presenta importanti modifiche rispetto a quella del campo chiaro, poiché si contraggono le basi di entrambe le microscopie.

Mentre i raggi di luce sono concentrati nel campo della luce in modo che attraversino direttamente il campione, nel campo scuro le travi sono disperse in modo che solo obliquo raggiungano il campione. Questi vengono quindi dispersi dallo stesso campione, trasmettendo l'immagine verso l'obiettivo.

Se si trattasse di focalizzare un foglio di campionamento, verrebbe osservato un cerchio scuro, poiché senza campione non c'è nulla per disperdere la luce verso il bersaglio.

Per ottenere l'effetto desiderato sul campo visivo, è necessario l'uso di condensatori specifici, nonché diaframmi che aiutano a controllare le travi di luce.

In un campo visivo di campo scuro gli elementi o le particelle in sospensione sono luminosi e trasferenti mentre il resto del campo è buio, rendendo un contrasto perfetto.

Se viene utilizzata la luce o l'incidente obliquo, si ottiene un effetto bordo con elevato sollievo nelle strutture osservate.

Parti del microscopio a campo scuro

Fonte: Amazon.com

-Sistema meccanico

Tubo

È il dispositivo attraverso il quale l'immagine si riflette e aumentata dal bersaglio viaggia fino a raggiungere l'OCulare o l'Ocular.

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Mescolata

È il supporto in cui si trovano i diversi obiettivi. Gli obiettivi non sono fissati, questi possono essere rimossi. Il revolver può ruotare in modo tale da poter cambiare il tuo obiettivo quando l'operatore ne ha bisogno.

Macro vite

Questa vite viene utilizzata per focalizzare il campione, si sposta in avanti o indietro per portare o spostare il campione target e il movimento è grottesco.

Vite micrometrica

La vite micrometrica si sposta in avanti o indietro per portare o allontanare il campione del bersaglio. La vite micrometrica viene utilizzata per movimenti molto fine o delicati, quasi impercettibile. È quello che raggiunge l'approccio definitivo.

Platen

È il supporto in cui il campione sulla diapositiva si baserà. Ha un'apertura centrale in cui passano i raggi della luce. Quando le viti macro e micrometriche si muovono, il piano sale o basso, a seconda del movimento della vite.

L'auto

L'auto ti consente di viaggiare con l'obiettivo dell'intero campione. I movimenti consentiti sono in avanti e indietro e viceversa, e da sinistra a destra e viceversa.

Figura pinzetta

Questi sono sulla platina. È importante che il campione rimanga fisso durante l'osservazione. I dispositivi di fissaggio hanno la misura esatta per ricevere la diapositiva.

Braccio o maniglia

Il braccio si unisce al tubo con la base. È il luogo in cui il microscopio dovrebbe essere afferrato quando si sposta da un lato all'altro. Con una mano, il braccio viene preso e con l'altra mano la base è fissata.

Base o piede

Come suggerisce il nome, è la base o il supporto del microscopio. Grazie alla base il microscopio è in grado di rimanere fisso e stabile su una superficie piana.

-Sistema ottico

Obiettivi

Hanno una forma cilindrica. Hanno una lente in basso che aumenta l'immagine che proviene dal campione. Gli obiettivi possono essere di vari aumenti. Esempio: 4.5x (ingrandimento del vetro), 10x, 40x e 100x (obiettivo di immersione).

L'obiettivo di immersione è così chiamato perché ha bisogno del posizionamento di alcune gocce di petrolio tra il bersaglio e il campione. Gli altri sono chiamati obiettivi asciutti.

Gli obiettivi portano le caratteristiche che hanno stampato.

Esempio: il segno del produttore, la correzione della curvatura del campo, la correzione dell'aberrazione, l'aumento, l'apertura numerica, le speciali proprietà ottiche, i mezzi di immersione, la lunghezza del tubo, la distanza focale, lo spessore delle coperture del colore.

Gli obiettivi hanno una lente anteriore situata nella parte inferiore e una lente posteriore situata nella parte superiore.

Oculare

I vecchi microscopi sono monoculari, cioè hanno solo un oculario oculare e i microscopi moderni sono binoculari, cioè hanno due occhi.

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Gli occhi sono a forma cilindrica e vuota. Questi hanno obiettivi convergenti all'interno dell'immagine virtuale creata dall'obiettivo.

L'oculare si lega al tubo. Quest'ultimo consente all'immagine trasmessa dal bersaglio di raggiungere l'occhio, che la aumenterà di nuovo.

L'oculare nella sua parte superiore contiene una lente oculare e nella sua parte inferiore ospita un obiettivo chiamato collettore.

Ha anche un diaframma e a seconda di dove si trova avrà un nome. Coloro che sono tra le due lenti sono chiamati huygens ocular e se si trova dopo che le 2 lenti sono chiamate l'occhio di Ramsden. Anche se ce ne sono molti altri.

L'aumento degli intervalli oculari tra 5x, 10x, 15x o 20x, a seconda del microscopio.

È attraverso oculare o oculare che l'operatore può visualizzare il campione. Alcuni modelli portano un anello nell'occhio sinistro che è mobile e consente la regolazione dell'immagine. Questo anello regolabile si chiama anello Dioptrías.

-Sistema di illuminazione

Lampada

È la fonte di illuminazione e si trova nella parte inferiore del microscopio. La luce è alogena ed è emessa dal basso verso l'alto. Di solito la lampada che ha i microscopi è 12 V.

Diaframma

Il diaframma dei microscopi a campo scuro manca di iride; In questo caso, questo impedisce ai raggi che provengono dalla lampada per raggiungere direttamente il campione, solo i torte obliqui toccheranno il campione. Quelle sono disperse dalle strutture presenti nel campione sono quelle che passano al bersaglio.

Questo spiega perché le strutture sembrano luminose e luminose in un campo scuro.

Condensatore

Il condensatore di un microscopio a campo oscuro differisce dal campo di luce.

Esistono due tipi: condensatori di rifrazione e condensatori di riflessione. Quest'ultimo a sua volta è diviso in due categorie: i paraboloidi e i cardioidi.

Condensatori di rifrazione

Questo tipo di condensatore ha un album che viene portato per rifrattare i raggi di luce, può essere posizionato sopra la lente anteriore o sul lato posteriore.

È molto facile improvvisare un tale condensatore, poiché è sufficiente posizionare un disco fatto in cartone nero con una dimensione inferiore alla lente (diaframma) davanti alla lente anteriore davanti alla lente del condensatore (diaframma).

Un microscopio ottico chiaro può diventare un microscopio a campo scuro usando questo consiglio.

Capacità di riflessione

Sono quelli usati dai microscopi stereoscopi. Esistono due tipi: paraboloidi e cardioidi.

• Paraboloidi: Hanno un tipo di curvatura chiamata paraboloidi per la loro somiglianza con una parabola. Questo tipo di condensatore è ampiamente utilizzato nello studio della sifilide, poiché consente di osservare i treponemi.
• Cardioidi: La curvatura del condensatore è simile a un cuore, da cui il nome che riceve "cardioide", trasportando il condensatore lo stesso nome. Ha un diaframma regolabile.

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Funzioni

-È usato per indagare la presenza di Treponema pallidum In campioni clinici.

-È anche utile per osservare lo stress e lepospiras.

-È l'ideale per osservare il comportamento In vivo di cellule o microrganismi, purché non sia necessario dettagliare le strutture specifiche.

-È l'ideale per evidenziare la capsula o il muro dei microrganismi.

 Vantaggi

-I microscopi a campo scuro con condensatore di rifrazione sono più economici.

-Il suo uso è molto utile in 40x aumenta.

-Sono ideali per osservare campioni che hanno un indice di rifrazione simile al mezzo in cui si trovano. Ad esempio, cellule di coltivazione, lieviti o batteri mobili come spirochete (borrelia, leptospiras e treponemi).

-La cellula può essere osservata In vivo, che consente di valutare il tuo comportamento. Ad esempio, movimento browniano, movimento di flagello, movimento di emissione di pseudopodi, processo di divisione mitotica, cova di larve, gemi di lievito, fagocitosi, tra gli altri.

-Permette di evidenziare i bordi delle strutture, ad esempio la capsula e la parete cellulare.

-È possibile analizzare le particelle disintegrate.

-L'uso dei coloranti non è necessario.

 Svantaggi

-È necessario prestare particolare attenzione durante la guida dei preparativi, poiché se sono molto spessi, non sarà ben osservato.

-La risoluzione delle immagini è bassa.

-I microscopi a campo scuro che usano i condensatori di rifrazione hanno una percentuale di luce molto bassa.

-Per migliorare la qualità dell'immagine con l'obiettivo di immersione (100x) è necessario che l'apertura numerica degli obiettivi sia ridotta e aumenta quindi quella del cono illuminante. Per questo, l'incorporazione di un diaframma aggiuntivo che può regolare l'apertura numerica dell'obiettivo è indispensabile.

-Non è possibile visualizzare i preparativi nei preparati asciutti o colorati, a meno che non siano coloranti vitali.

-Non consente la visualizzazione di determinate strutture, in particolare interno.

-I microscopi a campo oscuro sono più costosi.

Riferimenti

1. "Microscopio a campo oscuro." Wikipedia, Enciclopedia gratuita. 26 agosto 2018, 00:18 UTC. 30 giugno 2019, 01:06
2. Agudelo P, Restrepo M, Moreno N. Diagnosi di leptospirosi dei campioni di sangue e osservazione nel microscopio a campo scuro. Biomedico. 2008; 28 (1): 7-9. Disponibile da: scielo.org
3. Rodríguez f. Tipi di microscopi ottici. Blog di laboratorio clinico e biomedico. Disponibile su: Franrzmn.com
4. Collaboratori di Wikipedia. Microscopia a campo scuro. Wikipedia, l'enciclopedia libera. 19 ottobre 2018, 00:13 UTC. Disponibile su: Wikipedia.org
5. Bhatia M, Umapathy B, Navaneeth B. Una valutazione della microscopia a campo oscuro, della coltura e dei kit sierologici commerciali nella diagnosi di leptospirosi. Indian J Med Microbiol.2015; 33 (3): 416-21. Disponibile in: NLM.NIH.Gov