Caratteristiche blu di lattofenolo, composizione, preparazione, usi

Lui Lactofenolo blu o il blu di cotone è una preparazione con semplici proprietà da colorare. È usato nei laboratori clinici per colorare principalmente strutture fungine come ife, tubi germinativi e spore.

Aiuto nella diagnosi presuntiva o preliminare di alcuni funghi, tuttavia è sempre consigliabile rafforzare la diagnosi con test più specifici, come test biochimici o sierologici.

Rappresentazione grafica del colorante a lattofenolo blu, strisciata tinta di lattofenolo blu, preparazione montata sul microscopio. Fonte: immagini di dominio pubblico.net/https: // www.Youtube.com/orologio?v = p-kiffz7nvu/https: // www.Youtube.com/orologio?V = WSZ77T5L6E8

Il blu lattofenolo è composto da acido lattico, blu anilina, glicerina, fenolo e acqua deionizzata. Può essere preparato in laboratorio o può essere acquistato pronto per l'uso. Una volta preparato è pronto per essere utilizzato, in nessun caso dovrebbe essere diluita, poiché questa azione darà risultati scadenti.

La concentrazione dei suoi componenti rende ideale per tingere le strutture fungine, perché il fenolo elimina il microbiota batterica di accompagnamento, mentre l'acido lattico genera un film protettivo attorno alla struttura fungina. Infine, Aniline Blue ha un'affinità per aderire alle strutture dei funghi.

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Base

Con il lattofenolo blu viene eseguita una semplice colorazione delle strutture fungine di una certa cultura micologica. Si chiama semplice perché usa una singola colorante.

Il lattofenolo blu a parte la digatura, funge anche da campione chiarificante, grazie all'azione articolare dell'acido lattico e del fenolo, inoltre il fenolo si comporta come un mordente e allo stesso tempo evita la lisi del microrganismo inibendo gli enzimi idrolitici che loro sono può essere presente.

Mentre l'acido lattico preserva la morfologia delle strutture dei funghi.

D'altra parte, Aniline Blue ha la proprietà di aderire o guardare le strutture contenenti chitinie. Le strutture sono tinte di azzurro.

Va notato che la parete cellulare dei microrganismi fungini, in particolare le muffe, contengono chitina, motivo per cui questo colorante è ideale per tingere questi microrganismi.

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Caratteristiche

La soluzione blu di lattofenolo è una colorazione acquosa, fortemente acida, un aspetto leggermente nuvoloso, un colore blu chiaro. Rimane stabile se è protetto tra 15 ° C e 25 ° C. La bottiglia deve essere mantenuta correttamente chiusa. È irritante e corrosivo per la pelle e le mucose.

Composizione

La formula per la preparazione di un litro di blu lattofenolo è la seguente:

-250 g/L di acido lattico

-1.0 g/L di blu di anilina o blu metile

-500 g/L di glicerina

-250 g/L di fenolo

-250 ml di acqua deionizzata o distillata.

Il fenolo nell'acqua precedentemente abbellita viene sciolto. Vengono aggiunti acido lattico e glicerina e si mescolano molto bene. Infine, l'anilina blu si dissolve. Mescolare di nuovo ed è pronto per l'uso.

Le porzioni per preparare 80 ml di soluzione blu lattofenolo sono:

-20 g di cristalli di fenolo

-20 ml di acido lattico

-40 ml di glicerina o glicerolo

-20 ml di acqua distillata.

Utilizzo

Viene utilizzato per tingere le strutture fungine e, attraverso le caratteristiche morfologiche osservate a livello microscopico, per essere in grado di fare una diagnosi presuntiva del fungo.

Procedura

Colorazione di strutture di colture fungine

- Viene presa una pura cultura del fungo a cui vogliono osservare le loro strutture.

- Funziona preferibilmente in una campana di flusso laminare, o sotto l'accendino, usando toccanti e guanti, poiché è necessario l'operatore.

- In una diapositiva viene posizionata una goccia di lattofenolo blu.

- Un quadrato di nastro adesivo di buona qualità viene tagliato e aderisce con cura alla fine della maniglia del platino già sterilizzato e freddo.

- La maniglia platino si avvicina alla parte più superficiale della colonia fungina e tocca con molta attenzione il raccolto, esattamente dove si trova la pasta del nastro adesivo.

- Quindi impiega la diapositiva e posizionata proprio sulla goccia di lattofenolo blu, prendendosi cura che il nastro sia perfettamente esteso e lubrificato con il colorante. Molto delicatamente la maniglia del platino viene rimossa.

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- Un'altra goccia di lattofenolo blu sul nastro è posizionata e nella parte superiore. Non dovrebbe essere esercitata troppa pressione per non distruggere le strutture del fungo, poiché queste sono estremamente fragili. Il colorante deve essere lasciato per circa 3-4 minuti.

- Dopo questo periodo, la preparazione è pronta per essere osservata a un microscopio 10x o 40x. Se è richiesta un'osservazione 100x, è necessario utilizzare l'olio di immersione.

- Le strutture dei funghi sono generalmente osservate il colore blu, ad eccezione dei funghi dematiaci che manterranno il loro colore marrone caratteristico di questo tipo di funghi.

Tinione di campioni biologici diretti

Se è richiesto un campione biologico diretto, come espettorato, pus, essudati, secrezioni, tra gli altri, devono avere una precedente procedura di interruzione del campione. La soluzione NaOH viene utilizzata per questo.

In caso di campioni di capelli questi possono essere tinti direttamente.

Diversi capelli colpiti (10 in totale) delle lesioni presuntive di Tña capitis (aree allopéciche) vengono prelevati e posizionati su uno scivolo (da 3 a 4 capelli per scivolo). Sopra alcune gocce di lattofenolo blu e immediatamente coperte da una copertura.

Prendi la diapositiva con un morsetto delicatamente su un accendino. Per fare questo, fare da 3 a 4 passaggi veloci per la fiamma. Guarda il microscopio in 40x e cerca spore all'esterno o all'interno dei capelli (rispettivamente Ectothrix o Endothrix). Se necessario, posizionare l'olio di immersione e osservare in 100x.

Colorazione germinale del tubo nell'identificazione di Candida albicans

Dopo aver incubato la cultura presuntiva di Candida albicans Nel siero umano per 2-4 ore a 37 ° C, una porzione della soluzione viene presa e colorata con il lattofenolo blu. La preparazione è osservata al microscopio 40x. Il tubo germinativo è presente e le blastospora sono blu brillanti.

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Foglio di sicurezza del lacofenolo

La National Fire Protection Association (NFPA), stabilisce il foglio di sicurezza delle sostanze chimiche per quanto riguarda il rischio che rappresenta secondo diversi aspetti, questi simboleggiano attraverso un rombo di colori e un numero che va da 0-4.

Il rischio per la salute è identificato in blu, infiammabilità in rosso, instabilità o reattività gialla e alcuni speciali pericoli bianchi.

Salute

Il rischio per la salute presentata dal blu lattofenolo secondo l'NFPA è il livello 3. Ciò significa che la sostanza è estremamente pericolosa quando è ingerita o è in contatto diretto con la pelle o le mucose.

È una sostanza altamente corrosiva e irritante.

Quando il contatto con la pelle e le mucose causano gravi ustioni.

Se ingerito può causare mal di testa, confusione, letargia, incoscienza, arresto respiratorio e persino morte.

Infiammabilità

Secondo NFPA, il lattofenolo blu è classificato nel livello 1 in termini di infiammabilità. Ciò significa che rende la combustione solo se viene riscaldata sopra i 94 ° C.

Instabilità

Catalogato secondo l'NFPA al livello 0 (zero) in termini di reattività. Ciò significa che non ha alcun rischio di reattività, cioè è una sostanza chimicamente stabile.

Pericoli speciali

Non offre ulteriori pericoli speciali.

Riferimenti

1. Laboratorio SAR. Lactofenolo blu. 2010. Disponibile su: Labsar.com.
2. Laboratorio di chimica clinica applicata. Lactofenolo blu. 2015. Disponibile su: Cromakit.È
3. Merck Laboratories. Microscopia blu lattofenolo in soluzione. 2017. Disponibile su: utenti/team/download
4. Carta di emergenza. Lactofenolo blu in soluzione di colorazione fungina. Javeriana Pontifical University, Bogotá Colombia. 2014. Disponibile su: Javeriana.Edu.co
5. González M, Diamont D, Gutiérrez B. Tecnica di stagno di strutture fungine con coloranti vegetali come alternativa non innovante. Bioagro, 2011; 23 (1): 65-68. Disponibile su: Redalyc.
6. Laboratorio Himedia. Lactofenolo blu cotone. 2017. Disponibile da: Himediabs.com
7. Wanger A, Chavez V, Huang R, Wahed A, Actor J, Dasgupta A. Test biochimici e tecniche di colorazione per l'identificazione microbica. Sciencie Direct, 2017; 61-73. Disponibile da: Elsevier