Agar Salt e Mannitolo ciò che è, Fondazione, preparazione, usi

Lui Gank Sal e Manitol O Salado Manitol è un mezzo di coltura solido, selettivo e differenziale. È stato creato da Chapman per l'isolamento di agenti patogeni Gram positivi, in particolare Staphylococcus aureus.

Tuttavia, è anche utile isolare Staphylococus epidermidis, che a volte può essere presente come patogeno opportunistico e Staphylococcus saprofiticus, patogeno urinario riconosciuto, tra le altre specie.

A. Fiola con salitol Salado preparato testa. B. Piastre di agar da sala da sala manitol piantate con ceppi batterici di fermentazione e non fermentari di manitol. Fonte: A e B: foto scattate dall'autore MSC. Marielsa Gil.

Alcuni enterococcus sono in grado di crescere in questo mezzo, così come alcuni formatori di spore positive a bacilli Gram.

Questo mezzo è molto utile nell'analisi dei campioni clinici, ma viene anche utilizzato nello studio microbiologico degli alimenti e nel controllo di qualità dei prodotti industriali, come cosmetici, medicinali, tra gli altri.

L'agar salato di mannitolo è composto da estratti e peptone di carne bovina, tripteina, mannitolo, cloruro di sodio, fenolo rosso e agar e agar.

Base

L'agar Manitol è selettivo grazie all'alta concentrazione di sale che ha. La salinità funge da sostanza inibitoria e impedisce la crescita dei batteri Gram negativi.

È anche differenziale a causa della presenza di carboidrati di manitol e indicatore di pH rosso. Da questo, i batteri in grado di fermentare la manitole producono acidi, acidificando il mezzo, trasformando le colonie e il mezzo giallo.

D'altra parte, le colonie che non fermentano la manitole crescono nel mezzo prendendo i nutrienti che forniscono loro gli estratti e le peptone di carne e tripteine. Da lì i batteri estraggono carbonio, azoto, vitamine e minerali necessari per la crescita.

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Le colonie in questo caso possono essere rosa deboli o forti, e il mezzo rimane dello stesso colore o cambia al fucsia.

L'agar è la sostanza che fornisce la coerenza all'ambiente.

Preparazione

Per preparare un litro di agar salato di mannitolo, 111 gr del mezzo disidratato della casa commerciale di preferenza e dissolversi in 1000 ml di acqua distillata, usando una soluzione.

Il calore viene applicato spesso mescolando i mezzi per migliorare il processo di dissoluzione. Viene bollito per un minuto.

Il fissola viene posto nell'autoclave a 121 ° C per 15 minuti.

Una volta terminato il tempo, la fissala autoclave viene rimossa, lascia riposare e servire tra i 15 e i 20 ml su piastre di Petri sterili quando la temperatura è di circa 50 a 55 ° C.

È consentito consolidare, ordinando in modo invertito in piastrine e mantenendo il frigorifero fino al suo utilizzo. Prima di seminare un campione, è necessario attendere che la piastra prenda la temperatura dell'ambiente.

Le piastre vengono seminate per striatura o per superficie piantate con drigalski spatola. Il pH finale del mezzo preparato deve essere a 7,4 ± 0,2

Il colore del mezzo disidratato è il beige leggero e il colore del mezzo preparato è arancione rosso.

Applicazioni

A causa della sua alta selettività, questo mezzo è l'ideale per seminare campioni con flora mista in cui si desidera cercare la presenza di Staphylococus aureus, come il principale patogeno di questo genere.

In questo senso, uno dei suoi usi più frequenti è nell'analisi microbiologica di campioni di essudati faringei e secrezione nasale, in particolare per rilevare i portatori asintomatici di S. aureola.

Alcuni paesi hanno implementato questa analisi come requisito obbligatorio per le persone che desiderano lavorare come veneratori alimentari.

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Questo controllo impedisce alle persone di trasportare S. aureola, evitando così che ci sono enormi avvelenamenti alimentari, A causa del consumo di cibo contaminato con enterotossina stafilococcica.

Può anche essere incluso nella piantagione di infezioni della ferita, emocolture, CSF, lavaggio del bronco alveolare, tra gli altri.

L'agar salty mannitolo è utile per le colonie realar di uroculture di agar o agar nel sangue il cui grammo ha rivelato cocco gram positivi nei cluster.

È anche valido nell'analisi microbiologica di cibo, acqua potabile, terreni, tra le altre applicazioni.

QA

Una volta preparato un boom con l'agar salato di mannitolo, è consigliabile eseguire il controllo di qualità. I controlli sono seminati per mostrare se c'è o meno crescita di essi.

Come controllo positivo puoi usare ceppi noti di Staphylococcus aureus. Deve crescere in modo soddisfacente che sviluppa colonie gialle e il mezzo diventa anche lo stesso colore.

Allo stesso modo, è conveniente includere una tensione nota di Staphylococcus epidermidis. Deve coltivare in modo soddisfacente le colonie rosa e il mezzo rimane dello stesso colore o si oscura in un rosa più forte.

Come controllo negativo, vengono utilizzati i ceppi che non dovrebbero crescere in questo mezzo. Ad esempio, puoi seminare una tensione nota di Escherichia coli o Klebsiella pneumoniae. Il risultato atteso è la completa inibizione, cioè nessuna crescita.

Inoltre, una piastra senza inocularsi deve essere incubata. Non ci dovrebbe essere alcuna crescita o cambiamento di colore.

È importante che la piastra non sia utilizzata se ci sono indicazioni di deterioramento, come l'inquinamento, la disidratazione, lo scolorimento, tra gli altri.

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Considerazioni finali

Quando si utilizza il mezzo di mannitolo salato, alcuni aspetti importanti devono essere presi in considerazione:

-Ottenere una crescita di colonie gialle non indica che lo è Staphylococcus aureus. Ricorda che alcuni ceppi di Enterococcus sono in grado di crescere in questo mezzo e fermentare mannitolo, nonché alcuni bacilli Gram positivi.

Pertanto, è importante fare un grammo alla colonia e un test della catalasi.

-D'altra parte, dobbiamo considerare altre specie di Staphylococcus diverse da aureola Sono anche in grado di fermentare mannitolo. Pertanto, è importante per la colonia sub-culturale a un brodo nutritivo da prendere da lì ed eseguire il test della coagulasi.

Tra le specie di importanza clinica di Staphylococcus per l'uomo che fermenta il mannitolo ci sono: S. Aureus, s. Simulans, s. Capitis ssp capitis, s. Capitis ssp urealyticus, s. Xylosus, s. Cohnii ssp urealyticum, tra gli altri.

Altri possono dare una reazione variabile, cioè a volte positiva e talvolta negativa. Alcuni sono S. Saprofitico, s. Haemolyticus, s. Warneri, s. Intermedius, tra l'altro.

-Non è raccomandato di prendere le colonie direttamente dall'agar Manitol per eseguire il test della coagulasi, poiché l'alta concentrazione di sale dal mezzo può interferire con il risultato.

-Infine, si consiglia S. aureola Possono lentamente fermentare il mannitolo, sebbene questo non sia molto frequente.

Riferimenti

1. Britania Laboratories. Agar di Salado Manitol. 2015. Disponibile su: Britaniab.com
2. Laboratori BD. BD Mannitolo Salt Agar. 2013. Disponibile su: BD.com.