Fondazione e preparazione Orceína

IL Orceina È una tintura viola naturale, estratta da vari licheni come: orchilla o urchilla, lichene fruttuose, Rocella Tincoria E Parella Lecanora soprattutto. IL Rocella Tincoria Si trova nel continente africano e americano, sebbene possa essere sostituito da altre specie situate in Europa.

Questo colorante è stato ampiamente utilizzato negli studi citogenetici fin dai tempi antichi. In questo senso, la preparazione di orceina che include acido acetico, è stata introdotta da Lacourt nel 1941, quindi inizialmente era chiamata tecnica Lacourt.

Struttura chimica della soluzione di orceina e orceina. Fonte: Wikipedia.Org/ oguenther a di.Wikipedia (Dr. Guenther) [dominio pubblico]

Allo stesso modo, grazie alla sua semplicità e a basso costo, è stato utilizzato per la produzione di cartina di tornasole (colorazione estratta dai licheni) e in studi istologici (colorazione cellulare e tissutale).

Diversi studi hanno usato questa colorazione combinata con altri prodotti chimici, come picrocarminat ammoniaco e acido acetico, per colorare le fibre elastiche e i cromosomi rispettivamente. Al momento, l'orceina rimane utilizzata negli studi citogenetici di animali e verdure.

Di recente, Silva et al. Il 2017 ha usato con successo questa colorazione per osservare i vari cambiamenti che si verificano nelle fibre elastiche della pelle del pollice negli anziani cileni. Questo studio ha rivelato come le fibre del pollice siano modificate dall'invecchiamento.

In questo senso, sono state osservate le fibre elastiche del colore marrone-negruzco negli individui di oltre 80 anni; Mentre nei più giovani (da 60 anni) possono essere visti con marrone rossastro. Il citoplasma e altre strutture cellulari diventano verde giallastro.

Ciò ha permesso di confermare la presenza e lo stato delle fibre elastiche, in termini di disposizione, quantità e integrità. D'altra parte, è stato anche sottolineato che l'orcita è utile per identificare gli aneurismi e diagnosticare l'arterite, tra le altre condizioni.

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Base

L'orceina fa parte del gruppo di coloranti e colorazione di ossazina si basa sulla sua affinità per il DNA. Il colorante si unisce al carico negativo di questa molecola, rappresentata dal gruppo fosfato. Ecco perché i cromosomi sono tinti di viola.

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Tuttavia, il resto delle strutture cellulari prende un altro colore. In particolare, nel caso delle fibre elastiche, questi sono colorati di un colore marrone rossastro, nuclei cellulari da un blu viola blu, mentre il collagene non è tinto.

Pertanto, l'orceina viene utilizzata per tingere la cromatina e differenziare il sesso in alcune mosche di mosche. Allo stesso modo, i nuclei e alcune inclusioni epatiche prodotte dagli antigeni dell'epatite B possono essere colore.

Le soluzioni di orceina hanno funzioni specifiche nella colorazione. Orceina A, ha la funzione di ammorbidire le membrane cellulari, causando la loro morte e paralizzando il processo di divisione dello stesso. Nel frattempo, Orcein B è responsabile del completamento del colore per la sua adesione ai cromosomi.

Preparazione

1% di soluzione di aceto-orceina

Per preparare una soluzione di soluzione all'1%.

Quindi, viene costantemente miscelato per omogeneizzare la soluzione, per lasciarsi in seguito fino a quando non si raffredda. Infine, 4 ° C è conservato in barattoli scuri. Questa preparazione è stata utilizzata da Flores 2012, per l'osservazione delle fasi di maturazione degli ovociti di mucca.

In questo caso, ad esempio, viene posizionata la soluzione di aceto-orceina sul tessuto precedentemente fissata in acido acetico-stanolo per 24 ore. Questo processo di colorazione viene eseguito per 30 minuti e successivamente il tessuto è sottoposto a scolorimento.

Allo stesso modo, questo può essere usato nell'identificazione degli organelli nei tessuti multicellulari. In questo caso, viene tinto uno striscio della mucosa orale con una goccia della soluzione di aceto-orceina, la copertura viene posizionata sul foglio e immediatamente si può osservare il nucleo cellulare con le sue sottostrutture.

Soluzione latto-proporzione orceina 1%

Inoltre, l'orceina può essere preparata con altre sostanze chimiche come l'acido lattico e l'acido propionico. Per fare ciò, un grammo di orceina si dissolve in pre -ambienti a temperatura ambiente di 23 ml di acido lattico e 23 ml di acido propionico; Completare il volume con acqua distillata fino a 100 ml.

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Con questa soluzione latto-propionica Orceína puoi vedere le diverse fasi della divisione meiotica delle cellule vegetali. In questo caso, il campione precedentemente preferito e idrolizzato viene posizionato per 15 minuti nella soluzione di orceina latto-propionica e quindi estende il tessuto nelle fette di scorrimento.

Nello studio Duke 2016 sui cromosomi politeni, ha utilizzato una preparazione di 2 grammi di orceina diluita in acido acetico e acido lattico all'85%, diluendo con una soluzione di acido acetico al 65%. Alla fine, osservò i cromosomi nelle ghiandole salivari del Drosophila melanogaster.

Orceina A e orceina B

È importante tenere presente che a seconda del campione e di ciò che si desidera valutare, viene preparata la soluzione corretta dell'orceina. Pertanto, ad esempio, la soluzione di orceina A viene aggiunta 1n acido cloridrico per l'osservazione delle cellule di divisione.

Mentre la soluzione di Orceina B, finisce per dissolversi in acido acetico al 45%. Questa tecnica costituisce un metodo di colorazione abbreviato e, in generale, viene utilizzato come complemento per colorare le strutture cromosomiche.

Considerazioni finali

Dall'ultimo secolo, nei paesi del continente americano come Argentina puoi ottenere licheni come: Lecanora, Parmelia E Ombelica, che sono grandi fonti di orceina. Anche aree europee come le isole Canarie, erano grandi produttori di Orchilla in quel momento.

Questo è stato esportato in altre città di questo stesso continente come Genova e paesi come l'Inghilterra, mentre l'Olanda. Quindi questo lichene fu successivamente ridotto fino a quando non stava per estinguere.

Ciò ha portato all'orchilla è stato sostituito da altre piante con proprietà di tintura. Tuttavia, l'emergere di coloranti sintetici ha contribuito al completamento di questa fonte di Licen Orcein.

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Ciò fu possibile grazie a Cocq, che nel 1812 descrisse la sintesi dell'orceina, sapendo che questo è sintetizzato da un composto fenolico chiamato Orcinol. Tuttavia, nonostante ciò, l'orcita naturale è ancora la preferita.

Ciò può essere dovuto al fatto che l'orcinolo è un composto di odore molto forte e la cui esposizione prolungata potrebbe portare a rischi per la salute, come la perdita della capacità di rilevare gli odori. Questi danni all'ipofisi potrebbero spostarsi da temporanei a permanenti, più alta è la mostra.

Riferimenti

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