Half Stuart Foundation, preparazione e usi

Lui Mezzo stuart È un agar semi -solido o un brodo senza sostanze nutritive, utilizzato per il trasporto di campioni biologici. Il suo scopo è quello di mantenere i ceppi presenti nel campione vitali per un certo tempo, ma senza aumentare la popolazione microbica.

Fu creato da Moffet, Young e Stuart nel 1948 e successivamente modificato da Toshach e Patsula. È composto da sodio glyceofosfato, tioglycoate di sodio, cloruro di calcio e aggiunta di agar. Quest'ultimo è presente nel mezzo semi -solido e assente nel liquido. Alcuni laboratori aggiungono blu di metilene.

Culturette con trasporto Stuart. Fonte: di: CDC/DR. Gilda Jones, cortesia: biblioteca di immagini di sanità pubblica

Di solito sono usati quando non è possibile seminare immediatamente il campione. In questo caso, il campione viene posto nei mezzi di trasporto, mentre viene trasferito in laboratorio che elaborerà il raccolto.

In questo modo è garantito che i microrganismi presenti rimangono vivi fino a quando non sono inoculati nei corrispondenti terreni di coltura.

Inizialmente, il suo uso era destinato a trasportare campioni uretrali o vaginali in cui la presenza di Neisseria gonorrhoeae. Successivamente, si sono resi conto che la loro utilità potrebbe essere più ampia.

Il mezzo Stuart si è rivelato molto efficiente nella conservazione di microrganismi labili e fastidiosi come Neisseria meningitidis, Haemophilus influenzae, Streptococcus pyogenes, Streptococcus pneumoniae, Corynebacterium difteriae, Bordetella pertusi, tra gli altri. Oltre ad altri microrganismi non annessivi come Enterobacteria.

Il mezzo Stuart in sostanza evita l'essiccamento del campione, mantiene l'equilibrio osmotico e mantiene i microrganismi a un pH ideale. D'altra parte, strategicamente questo mezzo non contiene nutrienti, questo impedisce la moltiplicazione dei microrganismi.

Nel mercato ci sono spettacoli speciali per il trasporto di campioni che contengono questo o altri mezzi di trasporto, chiamati Culturette. Possono anche essere preparati in laboratorio.

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Base

La fine del mezzo di trasporto Stuart è mantenere i campioni i più vicini al suo stato originale, fino a quando non viene elaborato.

Il glyceofosfato di sodio e il cloruro di calcio sono un sistema tampone che agisce mantenendo pH e osmolarità.

Mentre, il tiogliceto di sodio funge da agente riducente e, nel caso di contenente, gli dà la consistenza semi -solide, per ritardare l'ossigenazione dell'ambiente. Finalmente il blu di metilene è un indicatore di ossidazione, cioè rileva la presenza di ossigeno.

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Il mezzo semi-solido con indicatore redox è ideale per il trasporto di campioni in cui è sospetta la presenza di batteri anaerobici.

Caratteristiche dei mezzi di trasporto

Il mezzo Stuart, come qualsiasi mezzo di trasporto, soddisfa alcune caratteristiche, tra cui:

-Mantenere vitali i ceppi microbici presenti senza moltiplicare.

-Non contiene nutrienti; I suoi composti mirano a mantenere il campione idratato, in condizioni adeguate di pH e osmolarità.

-Inibisce l'autolizzato di alcuni delicati microrganismi, come il pneumococco.

-Il suo uso è temporaneo, non dovrebbe essere esteso troppo.

Preparazione

Mezzo solido stuart con indicatore redox

Preparazione fatta in casa

ingredienti

Sodio glyceoposfato 10 gr

Sodio tioglycoate 1.0 gr

Cloruro di calcio 0.1 gr

Blue metilene 0.002 gr

Agar -agar 3 gr

Acqua distillata 1 l

Mescola i componenti e scalda fino alla soluzione totale. Versare i tubi o gli Escobiliti speciali. Vengono introdotti nell'autoclave e sterilizzati a 121 ºC per 15 minuti. Lascia che i tubi si raffreddi verticalmente (sotto forma di un taco). Camera a temperatura ambiente.

Preparazione con mezzo commerciale

Pesare 14,1 gr del mezzo in 1 litro di acqua distillata. Riscaldare frequentemente agitando fino alla sua dissoluzione totale, puoi lasciarlo bollire. Il resto della procedura come già descritto.

Il mezzo disidratato è crema e preparato deve essere blu sulla sua superficie. Ciò è dovuto alla presenza di blu metilene.

Il pH del mezzo deve essere regolato a 7,4 ± 0,2

STUART liquido mezzo modificato (preparazione fatta in casa)

ingredienti

Sodio glyceoposfato 10 gr

Sodio tioglycoate 1 gr

Cloruro di calcio diidratato 0,1 gr

1000 ml di acqua distillata

Trasporta gli stessi ingredienti del semi-solido, ma non trasporta agar o blu metilene. In questo caso, i componenti senza riscaldamento vengono miscelati e 0,5 ml sono distribuiti in tubi da 16 x 125 mm con un coperchio del filo.

Sterilizza in autoclave a 121 ° C per 10 minuti. Per il campione di presa.

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I tubi sono immagazzinati a temperatura ambiente.

Applicazioni

Commercialmente ci sono dispositivi speciali per il trasporto di campioni chiamati Culturette; Questo dispositivo è un tubo allungato e sottile che porta un tampone all'interno e alla fine c'è un segmento che contiene il mezzo medio -solido o stuart liquido.

Il dispositivo si apre e con il tampone prende il campione. Quindi viene nuovamente introdotto nel tubo fino a quando la punta del tampone non viene inserita nel mezzo di trasporto semi-solido; Alcuni portano una spugna poliuretano impregnata con mezzo stuart liquido, con cui il campione viene preservato quando rimane bagnato.

Nel caso in cui sia sospettata la presenza di delicati microrganismi, si dovrebbero usare salioni di cotone con carbone nel campione.

I campioni che possono essere prelevati con tamponi o scope e trasferiti in questo mezzo sono essudati faringei, tamponi rettali e varie secrezioni, tra cui: vaginale, uretrali, ferite, oculari, otici e ascessi.

Durante il trasferimento del campione nei mezzi di trasporto verso il laboratorio, la presentazione dell'ambiente a condizioni ambientali estreme (molto freddo o molto calore) dovrebbe essere evitata (molto fredda o molto calore). Si dovrebbero anche evitare improvvisi cambiamenti di pressione atmosferica.

Il tempo in cui il mezzo è in grado di mantenere valido un microrganismo dipenderà dalla tensione in questione. Ad esempio, per i microrganismi del genere Neisserias e Haemophilus possono essere mantenuti praticabili per un massimo di 24 ore, ma ceppi come Salmonella o Shigella possono durare giorni e fino alle settimane.

Se si stima che l'elaborazione del campione possa richiedere più di 4 giorni, è preferibile congelare il campione a -70 ° C.

Identificazione del campione in mezzi di trasporto

I media di trasporto preparati o la cultura commerciale devono avere un'etichetta in cui verranno inseriti i seguenti dati:

Nome e cognome del paziente: Evita la confusione di campionamento.

Numero identificativo: È conveniente portare un ordine al lavoro.

Fonte del campione: Aiuta il batteriologo nella scelta dei mezzi di cultura appropriati.

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Trattare il medico: A volte è necessario per possibili consultazioni.

Data e ora del campione: È necessario per l'accettazione o il rifiuto del campione in base al tempo trascorso tra il campione e l'accoglienza in laboratorio.

Altre informazioni che sarebbero molto utili all'allegato sono:

La diagnosi presuntiva: Guida nell'aggiunta di mezzi di coltura speciale secondo il sospetto diagnostico.

Trattamento antibiotico: È utile essere attaccato all'antibiogramma.

Tutte queste informazioni sono fondamentali per garantire la buona elaborazione del campione.

QA

Per valutare il funzionamento del mezzo Stuart, è possibile inoculare ceppi noti e mantenuti a 25 ° C, come ad esempio: Bordetella pertussis ATCC 9340, Haemophilus influenzae ATCC 19418, Neisseria gonorrhoeae ATCC 19424, Neisseria Meningitidis ATCC 13090, Streptococcus pneumoniae ATCC 6301.

In tutti i casi dovrebbe recuperare il microrganismo in questione, conservato per 24 ore.

D'altra parte, altri ceppi come: Shigella flexneri ATCC 12022, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Streptococcus pyogenes ATCC 12344, Enterococcus faecalis ATCC 33186, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 e Escherichia coli ATCC 11775.

In tutti i casi è previsto un abbondante recupero fino a 96 ore.

Limitazioni

Alcuni studi assicurano che il glyceofosfato presente nel mezzo di Stuart possa essere metabolizzato da alcuni coliformi, tra gli altri batteri Gram negativi e quindi moltiplicate in questo mezzo.

Questo rischio aumenta, maggiore è ritardata l'elaborazione del campione. Allo stesso modo, la mostra del mezzo Stuart ad alte temperature durante il suo trasferimento influenza questo particolare.

Riferimenti

1. “Middle of Transport (microbiologia)." Wikipedia, Enciclopedia gratuita. 13 aprile 2018, 10:36 UTC. 1 aprile 2019. Disponibile su: questo.Wikipedia.org
2. Microkit Laboratories: Culture Media. Stuart Transportation Medium. Disponibile su: Disponibile in: Culture Media.com
3. Lablisan. Stuart Transport Medium. Disponibile su: Lablinsan.Cl
4. Scientifico MDM. I vantaggi di avere Stuart di trasporto microbiologico medio. Disponibile su: mdmcientify.com
5. Metrix Laboratories. Stuart. 2017. Disponibile su: metrixlab.MX
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