Mezzo fondazione Cary Blair, preparazione e usi

Lui Mezzo Cary Blair È un agar semi -solide, usato per il trasporto e la conservazione di campioni biologici che ospitano patogeni intestinali, microrganismi labili e anaerobici. Come ogni mezzo di trasporto, la sua funzione è quella di mantenere il campione in condizioni ottimali fino a quando non viene coltivato. I microrganismi patogeni presenti, così come il microbiota di accompagnamento devono rimanere vitali, ma senza aumentare la popolazione.

Il Media Cary Blair è il risultato del cambiamento nella formulazione del trasporto di Stuart. La modifica è stata apportata nel 1964 ed è consistita nella sostituzione del sistema regolare di pH (glyceofosfato) con un tampone inorganico inorganizzato.

A. Culturette con mezzo cary blair b. Collezione di sgabelli con mezzo cary blair. Fonte: a. Video Meganhow, ottieni la cultura della ferita 2011 YouTube.pettine. Utente: Mattes [dominio pubblico]

La riformulazione era necessaria perché i suoi creatori si resero conto che il glyceofosfato dopo un po 'di tempo poteva essere metabolizzato da alcuni batteri saprofiti. Questi quando si moltiplicano si sovrappongono ai presenti agenti patogeni.

Altri cambiamenti è stata l'eliminazione del blu di metilene, nonché un riaggiustamento del pH verso l'alcalinità (pH 8,4). Tutti questi cambiamenti hanno migliorato l'efficienza dei mezzi di trasporto.

Originariamente il medio Cary Blair veniva utilizzato per il mantenimento di agenti patogeni intestinali, come Shigella flexneri, Salmonella SP, Vibrio cholerae e Campylobacter sp.

Tuttavia, successivamente è stata osservata l'efficacia della conservazione della vitalità dei microrganismi patogeni impegnativi e labili, come: ad esempio: Neisseria gonorrhoeae, Haemophilus influenzae, Neisseria meningitidis, Bordetella pertussis, Streptococcus pneumoniae e alcuni anaerobi.

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Base

Il medio Cary Blair contiene cloruro di sodio, tioglycoate di sodio, fosfato disodico, cloruro di calcio e agar.

Il cloruro di sodio mantiene l'equilibrio osmotico del mezzo, il fosfato disodio e il cloruro di calcio bilanciano il pH. Da parte sua, il tioglycelato di sodio mantiene un basso potenziale di riduzione dell'ossido, mentre la porzione di agar piccola fornisce la consistenza semi-solida.

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Il medio Cary Blair non contiene sostanze nutrizionali, poiché la funzione di un mezzo di trasporto è mantenere il campione senza le stesse modifiche in termini di umidità e carico microbico; Cioè, evita la disidratazione del campione che mantiene la vitalità e la quantità dei microrganismi presenti.

Infine, il pH leggermente alcalino evita la morte dei microrganismi a causa dell'acidità, in particolare le vibrazioni sono molto sensibili agli acidi.

Preparazione

Il media Cary Blair può essere acquistato commercialmente come dispositivo speciale pronto per l'uso. Il sistema di trasporto è coperto da un sacchetto di buccia in plastica. All'interno contiene un tampone per la raccolta del campione e il tubo del contenitore del mezzo semi -ssolido di Cary Blair.

Anche sul mercato ci sono case commerciali che forniscono il mezzo disidratato per la loro preparazione in laboratorio.

Per fare ciò, nonostante 13,2 gr del mezzo disidratato e dissolversi in un litro di acqua distillata. Calda e scuotere la preparazione fino a quando non ti dissolvi completamente. Distribuire il mezzo nei tubi di prova con coperchio filo (Baquelita).

Invia i tubi del vapore acqueo per 15 minuti. Lasciare raffreddare e mantenere a temperatura ambiente fino all'uso.

Il Blair Cary medio senza inocularsi può essere mantenuto in condizioni ottimali per un massimo di 18 mesi a temperatura ambiente.

Il pH medio deve essere regolato a 8,4 ± 0,2. Il colore del mezzo preparato è beige, con un po 'di opalescenza.

Utilizzo

Tipo di campioni

Il medio Cary Blair viene utilizzato quando c'è l'impossibilità di elaborare immediatamente i campioni di feci, i tamponi rettali e vaginali.

Quando non è possibile avere un mezzo di trasporto, i campioni possono essere mantenuti a -70 ° C.

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Campionamento

Il tampone è impregnato del campione ed è introdotto nei media Cary Blair, senza raggiungere il fondo.

Identificazione del campione

Il medio Cary Blair deve avere un'etichetta in cui vengono posizionati i dati di base, ad esempio: nome e cognome del paziente, numero di identificazione del campione, fonte del campione, trattamento del medico, data e ora di prelevare campione, diagnosi presuntiva, trattamento antibiotico.

Trasferimento

Copre bene e trasportato a temperatura ambiente nel caso di campioni fecali. Mentre, per campioni vaginali alla ricerca di microrganismi anaerobici, si raccomanda di trasportare campioni a 4 ° C.

In tutti i casi il tempo di trasferimento raccomandato è di 4-6 ore, con un massimo di 24 ore.

Se la presenza di Campylobacter Jejuni Nei campioni di feci e questi non possono essere elaborati in 24 ore, la conservazione è raccomandata in metà Cary Blair a 4 ° C.

Indagini condotte sui mezzi di trasporto Cary Blair

Numerosi studi hanno dimostrato che il medio Cary Blair può essere preservabile ai microrganismi enteropatogeni del genere Shigella e Salmonella fino a 49 giorni dopo il campione.

Per la sua parte, Vibrio cholerae, Un altro patogeno intestinale importante è in grado di sopravvivere per 22 giorni, mentre Yersinia pestis (L'agente causale della peste bubbonica e pneumonica) può essere recuperato dopo 75 giorni.

Tuttavia, nonostante la durata dimostrata per quanto riguarda il recupero di questi microrganismi, si raccomanda che i campioni prelevati vengano trasportati nel Medio Cary Blair al laboratorio il più rapidamente possibile.

Allo stesso modo, una volta che il campione raggiunge il laboratorio, deve essere seminato senza indugio nelle rispettive colture significa.

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D'altra parte, è anche raccomandato il medio Cary Blair oltre ad essere utile per il trasporto di microrganismi opzionali.

In questo senso, DeMarco e collaboratori nel 2017 hanno condotto uno studio intitolato: Sopravvivenza dei microrganismi vaginali in tre sistemi di trasporto disponibili in commercio.

Hanno dimostrato che i mezzi di Cary Blair sono il miglior mezzo di trasporto per la conservazione e il recupero di microrganismi anaerobici vaginali. Hanno anche dimostrato che il più alto tasso di recupero è stato raggiunto quando la temperatura di trasferimento era di 4 ° C.

Pertanto, si è concluso che la temperatura di trasporto per tamponi vaginali (microrganismi anaerobici) deve essere eseguita a 4 ° C. Mentre per campioni fecali alla ricerca di microrganismi opzionali, la temperatura ideale è ambientale.

QA

Per valutare il controllo di qualità del trasporto di blair di trasporto, i ceppi noti come Shigella Sonnei ATCC 11060, Salmonella coleraesuis  ATCC 14028, Vibrio cholerae E Campylobacter sp.

Il mezzo viene inoculato con la tensione scelta e mantenuto a temperatura ambiente per 24 ore. Quindi vengono seminati nei corrispondenti media di coltura. In tutti i casi è previsto un recupero soddisfacente del microrganismo in questione.

Riferimenti

1. DeMarco AL, Rabe LK, Austin MN, et al. Sopravvivenza dei microrganismi vaginali in tre sistemi commerciali disponibili. Anaerobe. 2017; 45: 44-49.
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