Agar Salmonella-Shigella

Lui Agar Salmonella-Shigella Conosciuto anche come Agar SS, è un mezzo moderatamente selettivo e differenziale, appositamente progettato per l'isolamento dei batteri enteropatogeni dei generi di Salmonella e Shigella, sia di campioni ambientali che clinici.

L'agar SS ha una composizione complessa; È costituito da estratto di carne, peptone, lattosio, sali biliare, citrato di sodio, tiosolfato di sodio, citrato ferrico, agar, rosso neutro, verde brillante e distillata. Data la sua grande selettività, i campioni possono essere seminati con abbondante flora mista.

Agar SS con colonie di Salmonella sp. Fonte: Manurx27 [CC BY-SA 4.0 (https: // creativeCommons.Org/licenze/by-sa/4.0)], da Wikimedia Commons

Nei laboratori di microbiologia, il mezzo Salmonella-Shigella è ampiamente usato per studiare la presenza di Salmonella e Shigella in campioni di feci diarreali, acque reflue, acqua potabile e cibo.

A volte è necessario utilizzare brodi pre-enrique (brodo di lattosado) e arricchimento (brodo di selenito cistina) per recuperare i ceppi di salmonella.

Questi passaggi sono richiesti quando l'esistenza di Salmonella è sospettata in quantità molto bassa o in cui la tensione può essere maltrattata dai processi di produzione industriale, principalmente alimenti trasformati. È inoltre consigliabile arricchire campioni di feci da pazienti che sono stati trattati con antibiotici.

Successivamente, il brodo arricchito può essere seminato in agar Salmonella-shigella e in altri media simili, come Xilosa Agar, Lisina desoxicolato (XLD) e Agar Hektoen Enteric (He).

Base

Ogni componente della cultura Salmonella-Shigella ha una funzione specifica e la miscela nel suo insieme fornisce le proprietà che la caratterizzano.

Potere nutrizionale

L'estratto di carne e il peptone (digerito con tessuto animale) forniscono i nutrienti richiesti (nitrogeni, carbonio e vitamine) per lo sviluppo di microrganismi in grado di tollerare il resto dei componenti.

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Consistenza

L'Agar -agar è responsabile di fornire solida coerenza all'ambiente.

Selettivo

Questo mezzo è altamente selettivo perché contiene sali biliari, citrato di sodio e verde brillante. Pertanto, inibisce la crescita di tutti i batteri Gram positivi e la maggior parte dei bacilli gram negativi, compresi alcuni coliformi.

Mentre i batteri del genere Salmonella e alcuni ceppi di Shigella se supportano questi composti.

Principalmente, il genere Salmonella è molto resistente ai sali biliare, così tanto che sono in grado di vivere nella cistifellea biliare di alcuni pazienti trasportati che espelleno costantemente i batteri da feci.

Differenziale

Il lattosio è carboidrato fermentabile che aiuta a differenziare i ceppi di fermentazione del lattosio dal non fermentazione. Questa proprietà è evidenziata dalla presenza dell'indicatore di pH, che in questo mezzo è il rosso di Fenolo.

I ceppi di fermentazione del lattosio danno colonie rosse, mentre il non ferment è incolore. Questa caratteristica è importante, poiché Salmonella e Shigella non fermentano il lattosio.

D'altra parte, questo mezzo contiene tiosolfato di sodio come fonte di solfuro e citrato ferrico come fonte di ferro. Entrambi i composti riescono a differenziare i batteri in grado di produrre idrogeno solforato. Questi reagiscono per formare un precipitato nero di solfuro ferrico insolubile e visibile.

Questa proprietà ha alcuni ceppi del genere Salmonella. Normalmente le sue colonie sono piatte incolori con un punto nero al centro dello stesso. Il resto delle salmonella non produce h₂S e svilupparsi come colonie incolori.

D'altra parte, le colonie del genere Shigella sono piatte incolo.

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Preparazione

Questo mezzo è molto semplice da preparare.

Pesare 63 gr di mezzo commerciale disidratato e dissolversi in un litro di acqua distillata. Scaldare la soluzione e agitare.  La miscela può raggiungere l'ebollizione per minuti per minuti.

Questo mezzo non deve essere autoclavato. Dopo la sua dissoluzione viene utilizzato direttamente su piastre semplici o doppie sterili.

Consolidando vengono ordinati in modo invertito in piastrine e sono immagazzinati in frigorifero (2-8 ° C) fino all'uso.

Il mezzo dopo preparato deve essere a pH 7,2 ± 0.2 e con rosso arancione.

È importante far temperatura delle piastre prima di seminare i campioni. Il campione originale può essere seminato direttamente, scaricando materiale in una parte dell'agar e poi da lì per essere lottato per esaurimento.

In caso di indossare brodi arricchiti, passando una parte del brodo di Selenito e semina con Drigalski Spatola.

37 ° C viene incubato per 24 ore in aerobiosi.

Tieni presente che la quantità di grammi nonostante e il pH finale del mezzo può variare da una casa commerciale all'altra. Il male medio porta sempre le indicazioni per la sua preparazione.

Utilizzo

È spesso usato nell'analisi delle coproulture e nello studio microbiologico di campioni di acque reflue, acque di consumo e cibo.

Vengono preparate spesso doppie piastre, da un lato l'agar Salmonella-shigella è posizionata e nell'altra agar XLD.

Limitazioni

-Alcuni ceppi di Shigella non crescono in questo mezzo. Pertanto, non è raccomandato per l'isolamento primario di questo genere.

-Non tutte le colonie trasparenti con centro nero sono indicativi di Salmonella; I test biochimici devono essere eseguiti per fare una corretta identificazione, poiché le colonie di alcuni ceppi proteici sono indistinguibili da quelle di Salmonella.

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-Il mezzo disidratato deve occuparsi dell'esposizione all'ambiente, poiché è molto igroscopico. Pertanto, deve essere tenuto in un ambiente secco e ben chiuso. Aperto per periodi molto brevi.

-Nel tempo i sali biliari del mezzo possono precipitare, formando un'immagine simile a un impigliato all'interno dell'agar, ma ciò non influisce sui risultati.

-Alcuni ceppi di Shigella possono lentamente fermentare il lattosio.

QA

Per dimostrare che il mezzo funziona correttamente, è consigliabile.

Per questo puoi usare i ceppi di E. Coli, Enterobacter SP, Klebsiella pneumoniae, Shigella flexneri, Salmonella Typhimurium O Enterococcus faecalis.

I risultati previsti sono:

Escherichia coli --Colonie convesse rosa.

Enterobacter e Klebsiella- Grandi colonie e mucoidi rossi o rosa.

Shigella flexneri --colonie piatte piatte o incolori.

Salmonella typhimurium - Colonie incolore con centro nero.

Enterococcus faecalis-- Inibizione totale.

Riferimenti

1. Diffco Laboratories Francisco Soria Melguizo. Agar Salmonella-Shigella. Disponibile su: F-Soria.È
2. Laboratorio BD. BD Salmonella-Shigella Agar. Disponibile su: BD.com