MacConkey Agar

Escherichia coli colonie su una piastra di agar MacConkey. Con licenza

Cos'è l'agar MacConkey?

Lui MacConkey Agar È un mezzo di coltura solida. Selettivo e differenziale, che consente l'isolamento esclusivo dei bacilli Gram -Negative. Per questo motivo consente di distinguere tra bacilli di fermentazione e non fermentazione del lattosio. È uno dei terreni di coltura più usati in un laboratorio di microbiologia.

Questo mezzo viene utilizzato principalmente per isolare i bacilli Gram -negativi appartenenti alla famiglia Enterobacteriaceae, comprese le specie opportunistiche ed enteropatogene.

Può anche essere usato per isolare altri bacilli enterici che abitano il tratto gastrointestinale, ma che non appartengono a Enterobacteriaceae, come SPERE SP, Pesiomonas SP, tra gli altri.

Infine, può isolare altri bacilli di glucosio non fermentativo presenti in ambiente, acqua o terreni, ma a volte possono essere agenti patogeni opportunistici, come Pseudomonas sp, Acinetobacter SP, SP, Chromobacterium vioaceum, stenotrophomonas maltopilia, tra gli altri.

Base

MacConkey Agar

Il fondamento di questo mezzo può essere spiegato attraverso la descrizione dei suoi componenti, poiché ognuno ha uno scopo che determina una proprietà.

Sali di bile e vetro viola

In questo senso, MacConkey Agar ha una composizione complessa. Innanzitutto, contiene sali biliari e vetro viola.

Questi elementi sono responsabili dell'inibizione della crescita dei batteri gram -positivi e di alcuni bacilli Gram -Negative. A sua volta, favorisce lo sviluppo di bacilli negativi a gram che non sono influenzati da queste sostanze. Pertanto è un mezzo selettivo.

Si dice che sia leggermente selettivo rispetto ad altri media che inibiscono anche la crescita dei batteri positivi al Gram e anche della maggior parte dei batteri negativi.

Peptonas, polipi e lattosio

Contiene sostanze che forniscono i nutrienti necessari ai microrganismi che si sviluppano in questo mezzo, come peptone, polipi e lattosio.

Il lattosio è il punto chiave per il mezzo per essere differenziale, poiché i microrganismi che hanno la capacità di fermentare il lattosio sviluppano forti colonie rosa.

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Alcuni batteri possono fermentare il lattosio lentamente o debolmente, sviluppando colonie rosa pallide e rimangono lattosio positivo.

Quelli che non fermentano il lattosio usano peptones come fonte di energia, producendo ammoniaca, alcalizzando il mezzo. Pertanto le colonie che hanno origine sono incolori o trasparenti.

Indicatore di pH

Il cambiamento di colore si ottiene attraverso un altro composto essenziale che MacConkey concorda. Questo composto è l'indicatore di pH, che in questo caso è il rosso neutro.

La fermentazione del lattosio genera una produzione di acidi misti. Acidificano il mezzo a un pH inferiore a 6,8.

Questo rende l'indicatore di pH vire verso un tono rosa intenso. L'intensità del colore può variare a seconda del pH finale.

Acqua distillata, cloruro di sodio e agar

D'altra parte, contiene acqua distillata e cloruro di sodio che danno l'idratazione e l'equilibrio osmotico all'ambiente. Infine, il mezzo contiene agar, che è la base che fornisce la coerenza del mezzo solido.

L'agar MacConkey preparato dovrebbe avere un pH finale regolato a 7,1 ± 0,2.

Preparazione

Per un litro di agar MacConkey, 50 gr del mezzo disidratato devono essere ponderati, quindi viene posizionato in una soluzione e si dissolve in un litro di acqua distillata. Dopo 10 minuti di riposo viene riscaldato mescolando costantemente fino a bollire per 1 minuto.

Quindi il fissola viene posizionato nell'autoclave e sterilizzato a 121 ° C per 20 minuti. Tempo culminato, viene rimosso dall'autoclave e lasciate raffreddare fino a raggiungere una temperatura di 45 ° C, per successivamente servire in Petri sterile.

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Lasciare solidificare e risparmiare in un supporto invertito e conservare in frigorifero a 2-8 ° C fino a quando l'uso.

Per ottenere un agar MacConkey che inibisce l'effetto di Swarning prodotto dal genere Proteus Un agar MacConkey basso viene utilizzato in sale.

Agar MacConkey convenzionale usi

• L'agar MacConkey è incluso in tutti i set di mezzi di coltura disposti per la semina dei campioni clinici ricevuti in laboratorio. È anche utile in microbiologia alimentare e microbiologia ambientale.
• La varietà di bacilli negativi Gram che crescono in questo mezzo espressero caratteristiche fenotipiche che aiutano una diagnosi presuntiva della specie in questione. Ad esempio, le dimensioni, il colore, la coerenza e l'odore delle colonie sono alcune delle caratteristiche che possono guidare.
• In questo ambiente, la specie di Escherichia coli, Klebsiella sp E Enterobacter sp produrre forti colonie rosa, circondate da una zona biliare precipitata.
• Mentre batteri come Citrobacter SP, Providence SP, Serratia SP e Hafnia SP Possono apparire senza colore dopo 24 ore o rosa pallido in 24-48 ore.
• Inoltre, i generi Proteus, Edwadsiella, Salmonella E Shigella produrre colonie incolore o trasparenti.

Altre varianti di agar MacConkey

Esistono altre varianti di agar MacConkey che hanno scopi specifici. Sono menzionati di seguito:

• Agar MacConkey con sorbitolo: Questo mezzo è stato progettato per distinguere il ceppo enteropatogeno (Escherichia coli Enterohemorágica O157: H7) del resto dei ceppi di Escherichia coli. Questo mezzo cambia carboidrato per lattosio per sorbitolo. I ceppi di E. coli Enterohemorágicas O157: H7 differisce dal resto perché non fermentano il sorbitolo e, pertanto, si ottengono colonie trasparenti, tuttavia, il resto dei ceppi E. coli sì fermenta il sorbitolo e le colonie sono rosa forte.
• Agar MacConkey senza cristallo viola o sale: Questo agar differisce molto dal classico agar MacConkey, perché non avere un cristallo viola può far crescere i batteri positivi al grammo. D'altra parte, l'assenza di Sal inibisce l'aspetto dello sciame sull'agar prodotto da alcuni bacilli enterici, come quelli del genere Proteus, e quindi facilitare l'isolamento di tutti i batteri presenti, compresi i batteri positivi a Gram.
• MacConkey Agar con cefopezone: Questa variante di Agar MacConkey è stata progettata inizialmente Laribacter Hongkongensis E più tardi si sono resi conto che era utile isolare Arcobacter Butzleri. AGli MBO sono bacilli negativi in ​​grammo leggermente curvi resistenti al cefoperazone. Questi batteri sono stati recentemente legati come causando gastroenterite e diarrea acquisiti in individui asiatici ed europei, profilando come due potenti agenti patogeni emergenti. L'antibiotico consente di inibire la flora di accompagnamento del tratto gastrointestinale, che favorisce lo sviluppo di questi batteri, impedendo loro di passare inosservato, poiché richiedono 72 ore per crescere.
• Agar MacConkey preparato con acqua di mare al 10% V/V: Questa variante è utile per la valutazione degli indicatori batterici sanitari della contaminazione fecale, tra cui coliformi totali e coliformi fecali nelle acque salate ricreative (spiagge e baie). I ricercatori hanno dimostrato che il mezzo preparato in questo modo aumenta in modo significativo il recupero di questi microrganismi nell'ambiente salino, rispetto all'uso dell'agar MacConkey preparato con acqua distillata. Questo perché nel mezzo modificato la crescita di batteri fisiologici in uno stato di latenza "praticabile, ma non coltivabile", quindi non sono recuperabili nei media convenzionali.

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Riferimenti

1. Forbes, b., Sahm, d., Weissfeld, a. Diagnosi microbiologica di Bailey e Scott. Pan -American Editoriale S.A.
2. Koneman, e., Allen, s., Janda, w., Schreckenberger, p., Winn, w. Diagnosi microbiologica. Pan -American Editoriale S.A.