Bhi agar ciò che è, fondazione, preparazione, usi

Lui Bhi agar o Infusione del cuore cerebrale. È un mezzo di coltura solida nutriente. In spagnolo ci riferiamo a lui come un'agar Cerebro Heart di infusione. È un mezzo di coltura non selettivo, il che significa che possono essere sviluppati tutti i tipi di batteri gram positivi e gram negativi, così come alcuni funghi di lievito e filamentosi.

È composto da infusione cerebrale e cuore di vitello, idrolizzato peptico -tessuto animale.

Va notato che BHI Agar è uno dei terreni di coltura più frequenti nei laboratori di batteriologia. Può essere utilizzato senza integratori come primario, soggettivo delle colonie ottenute in altri media selettivi o per il mantenimento dei ceppi in laboratorio.

D'altra parte, è un mezzo ideale da usare come base nella preparazione di media arricchiti, come l'agar nel sangue e l'agar al cioccolato. Entrambi gli ideali per isolare i microrganismi esigenti dal punto di vista nutrizionale. Tuttavia, si dovrebbe prendere in considerazione che, poiché contiene il glucosio non è adatto per osservare i modelli di emolisi.

Allo stesso modo, l'agar BHI può essere utilizzato per la preparazione di mezzi speciali per l'isolamento di microrganismi patogeni di crescita difficile nei media comuni, tra cui: Haemophilus sp, Francisella tularensis, Corynebacterium difteriae e Histoplasma capsulatum.

Con l'additivo antibiotico, l'agar BHI diventa un mezzo selettivo per l'isolamento fungino.

Base

È un terreno di coltura nutriente isolare microrganismi moderatamente esigenti, essendo in grado di aumentare il suo arricchimento con l'aggiunta di sangue e altri integratori nutrienti.

È un terreno di coltura non selettivo, quindi consente la crescita dei batteri più positivi e gram negativi, nonché alcuni funghi. Tuttavia, può diventare selettivo con l'aggiunta di antibiotici.

Il mezzo contiene infusione di cuore cerebrale e vitello, tessuto animale idrolizzato e tessuto di caseina pancreatico idrolizzato; Tutti questi composti agiscono come fonti di vitamine, aminoacidi, azoto e carbonio.

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Il glucosio è un carboidrato che fornisce energia ai microrganismi una volta che lo hanno fermentato. Mentre il cloruro di sodio e il fosfato disodio mantengono l'equilibrio osmotico e forniscono un pH vicino alla neutralità. Infine, l'agar dà solida coerenza all'ambiente.

Preparazione

Pesare 52 grammi del mezzo disidratato e dissolversi in un litro di acqua distillata. Porta la miscela a una fonte di calore fino a bollire, agitando frequentemente durante il processo di dissoluzione.

Puoi preparare zeppe o piastre di agar BHI senza additivi.

Cunei

Per la preparazione del cuneo, servire la preparazione fino a quando non riempiono la metà di ciascun tubo, copri e sterilizzano in autoclave a 121 ° C per 15 minuti, quando si va a letto su una base fino a quando non si solidificano. Successivamente mantieni il frigorifero fino all'uso.

Zeppe bhi per batteteroteca. Fonte: foto scattata dall'autore MSC. Marielsa Gil.

Piatti

La miscela disciolta è autoclava a 121 ° C per 15 minuti, quando la lascia è lasciata raffreddare fino a 50 ° C e sono servite 20 ml del mezzo in piastre sterili di Petri. Possono consolidarsi, essere investiti e conservati in frigorifero fino a quando non usano. Lascia che le piastre prendano la temperatura ambiente prima di seminare.

Il pH medio deve essere 7,4 ± 0,2.

Il mezzo non preparato è beige e preparato è ambra chiaro.

Agar di sangue

Dopo aver sterilizzato il mezzo, raffreddare fino a una temperatura approssimativa da 45 a 50 ° C, in quel momento aggiungere il sangue (50 ml), mescolare delicatamente per omogeneizzare e servire 20 ml su ogni piastra di Petri. Se le bolle sono formate sulla piastra, la fiamma più chiara sulle bolle per rimuoverle dovrebbe essere passata rapidamente.

Allo stesso modo, possono essere preparati supporti speciali aggiungendo gli additivi corrispondenti quando la miscela raggiunge la temperatura di 45 a 50 ° C.

Può servirti: capacità fisiche

Il mezzo è rosso ciliegia.

Applicazioni

Utilizzare senza integratori

L'agar BHI senza additivi è utile come coltivazione primaria e seminare puri ceppi di microrganismi poco o moderatamente esigenti per la sua successiva identificazione.

Poiché è un mezzo di colore chiaro, è ideale per l'osservazione dei pigmenti e anche non contenente sostanze interferenziali, alcuni test biochimici, come ossidasi e catalasi, o montando altri test biochimici da colonie di questo agar.

Allo stesso modo, l'agar BHI è ampio.

Le piastre o le zeppe piantate per superficie con ceppi batterici sono incubate a 37 ° C per 24-48 ore. Mentre, nei funghi, la temperatura e il tempo di incubazione dipenderanno dal tipo di funghi che si cerca.

Come agar di base per la preparazione di altri media

Con questa base puoi preparare supporti arricchiti e selettivi.

Arricchito

La sua funzione principale è quella di servire come base nella preparazione del sangue di routine -uso nei laboratori di microbiologia. Soprattutto, la base BHI è favorevole all'isolamento dei ceppi di Streptococcus sp. Tuttavia, ha l'inconveniente di non essere adeguato per l'osservazione dei modelli di emolisi contenente glucosio.

Viene anche usato nella preparazione di sangue di coniglio o cavallo Haemophilus sp. Per risultati migliori puoi aggiungere un supplemento di arricchimento (Isavalex).

Se i campioni provengono dal tratto respiratorio all'agar, la bacitracina può essere aggiunta per inibire la flora di accompagnamento e aumentare la probabilità di recupero dei ceppi dei ceppi di Haemophilus sp.

D'altra parte, puoi preparare il sangue (agnello o umano) con Cistina Telurito per isolare Corynebacterium difteriae. Allo stesso modo, è utile per preparare il sangue di coniglio, con l'aggregato di cistino e glucosio per l'isolamento di Francisella tularensis.

La semina delle piastre di agar nel sangue viene eseguita per esaurimento e incubata a 35-37 ° C per 24-48 ore in microaerofilia (5-10% di CO₂).

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Selettivo

Questo mezzo con l'aggregato di antibiotici può sostituire l'agar Sabouraud per l'isolamento fungino.

L'agar BHI combinato con cloramfenicolo - gentamicina o penicillina -, streptomicina e sangue di cavallo è ideale per l'isolamento di Histoplasma capsulatum.

A seconda del microrganismo che si cerca di isolare l'incubazione a 35-37 ° C o a temperatura ambiente in aerobiosi. A volte è necessaria l'incubazione in entrambi i gamme di temperatura, usando 2 piastre per questo.

Ad alcuni funghi piacciono Trichophyton mentagrophytes Devono essere incubati a temperatura ambiente per un massimo di 7 giorni.

QA

Da ogni lotto preparato si consiglia di incubare 1 piastra o cuneo a 37 ° C per 24 ore e verificare che non vi sia crescita; Soprattutto è importante quando si preparano il sangue, perché è un mezzo facilmente contaminabile.

D'altra parte, la qualità del mezzo può essere valutata inoculando i motivi noti o certificati e osservando il suo sviluppo.

In questo senso, per valutare l'agar BHI senza additivi puoi usare i ceppi di Escherichia coli ATCC 25922, Staphylococcus aureus ATCC 25923 O Candida albicans ATCC 10231. 37 ° C sono incubati in aerobiosi per 24-48 ore. In tutti i casi, è prevista una crescita soddisfacente.

Per valutare le piastre di agar nel sangue puoi seminare i ceppi  Streptococcus pyogenes ATCC 19615, Streptococcus pneumoniae ATCC 6305 o Trichophyton Mentagrophytes ATCC 9533.

I ceppi batterici sono incubati a 37 ° C in microaerofilia per 24 ore, mentre il fungo incuba a temperatura ambiente nella camera umida fino a 7 giorni. In tutti i casi è prevista una crescita soddisfacente.

Riferimenti

1. Britania Laboratories. Agar per infusione del cuore cerebrale. Disponibile su: Britaniab.com.
2. Laboratori BD. Agar Brain Heart Infusion (BHI). Disponibile su: BD.com.