Composizione dell'olio di immersione, caratteristiche, usi

Lui olio di immersione È un liquido viscoso e trasparente che ha un indice di rifrazione elevato. Per questo motivo è ampiamente utilizzato nelle osservazioni microscopiche, poiché fornisce la proprietà di concentrare la luce quando passa attraverso il bersaglio 100x del microscopio, aumentando la sua risoluzione di potenza.

Ciò si verifica perché si forma un film viscoso tra il bersaglio e lo striscio, impedendo ai raggi della luce di disperdersi quando raggiungono l'aria, concentrando le travi di luce verso il campione.

GoTero con olio di immersione e microscopio focalizzati con bersaglio 100x usando olio di immersione. Fonte: Pixabay.com

L'olio di immersione viene utilizzato solo con il bersaglio 100x. Ecco perché l'obiettivo di 100x è anche chiamato obiettivo di immersione. Il resto è noto come obiettivi asciutti. Questo obiettivo non può essere usato senza olio di immersione, perché senza questa visualizzazione non sarebbe soddisfacente.

La funzione principale dell'olio di immersione è fornire immagini più chiare, chiare e definite, consentendo l'osservazione di dettagli che non sarebbero possibili con altri obiettivi.

Il primo olio usato per questo scopo era l'olio di anice, usato accanto alla prima lente immersione creata da Giovanni Battista Amico. Ciò ha evitato solo l'aberrazione cromatica, ma non ha aumentato l'apertura numerica del sistema delle lenti.

Quindi veniva usato l'olio di cedro, ma presentava molti svantaggi che costringevano il suo disuso. Tra questi c'era la loro alta acidità, che ha danneggiato gli obiettivi a breve termine.

Successivamente, sono state utilizzate altre sostanze come l'acqua e la glicerina fino a quando non sono stati creati oli di immersione sintetica, che sono stati gradualmente perfezionati fino a raggiungere l'attuale olio di immersione, che è un composto complesso di sostanze organiche.

[TOC]

Composizione di olio di immersione

L'olio di immersione è costituito da una miscela di composti organici come: terfenil, terfenilico idrogenato, idrocarburi naturali e polibetani.

Può servirti: modifiche post -traslazionali

Caratteristiche dell'olio di immersione

L'olio di immersione è un liquido giallo chiaro, un aspetto leggermente viscoso, odore caratteristico e densità tra 0,92 e 0,99 GR/cm³.

Olio di immersione Non è solubile in acqua e ha un punto di ebollizione di 340 ° C. L'indice di rifrazione A (n. 20 ° C/D): oscilla tra 1.482 - 1.516. Mentre l'indice di infiammazione è di 110 ° C e la viscosità varia tra 100 e 120 MPa.S.

Questo prodotto deve essere adeguatamente scartato, poiché è ecotossico. Cioè, è dannoso per l'ambiente, colpendo principalmente gli animali acquatici. D'altra parte, è una pelle irritante e mucose. Se ingerito è nefrotossico e cardiotossico.

L'olio di immersione è stabile da 15 a 25 ° C, temperatura alla quale dovrebbe essere mantenuta.

Fondamenti di olio di immersione

Quando si utilizza il più alto aumento, l'intensità della luce deve essere sollevata. Tuttavia, molte delle travi di luce si perdono perché sono disperse quando raggiungono l'aria (spazio tra le coperture e le lenti) e persino alcuni raggi soffrono di un riflesso totale.

L'olio di immersione ha un indice di rifrazione simile a quello del vetro. Pertanto, quando l'olio tra l'obiettivo 100x e il rivestimento, le travi di luce vengono contattate, le luci sono concentrate.

I raggi concentrati attraversano il campione e aumentano la nitidezza dell'immagine, cioè l'apertura numerica dell'obiettivo aumenta e corregge le aberrazioni cromatiche e sferiche.

Usi o applicazioni

L'uso dell'olio di immersione è particolarmente necessario quando è necessario osservare un'immagine in modo più ampio, usando l'obiettivo di un aumento maggiore (obiettivo 100x) e quindi essere in grado di vedere i dettagli essenziali per stabilire una diagnosi.

Pertanto, è ampiamente utilizzato in studi microscopici da varie aree come: istologia, citolologia, ematologia e batteriologia. Ad esempio, è utile per lo studio delle caratteristiche delle cellule e dei tessuti di un paziente.

Può servirti: gametoogenesi

Serve anche per l'analisi dello striscio di sangue, dove vogliamo.

Di solito viene utilizzato in preparati fissi, in quanto non è raccomandato in freschi preparativi. Questo perché la tensione di superficie dell'olio fa muovere le coperture, il che ha origine che il campione si muove durante la sua osservazione e ne impedisce l'analisi.

D'altra parte, l'olio di immersione non è utile solo nella microscopia ottica convenzionale: viene anche utilizzato nei microscopi di fluorescenza della riflessione interna totale (TIRFM) e nelle applicazioni di fluorescenza confocale.

Passi per osservare una preparazione usando olio di immersione

Per vedere una preparazione al microscopio, la preparazione deve prima essere focalizzata con l'obiettivo di meno aumento, di solito il 10x, con poca intensità di luce.

Quindi va al bersaglio di 40x e il passaggio della luce è leggermente aumentato. Alcune analisi possono essere eseguite con questo aumento, ma per vedere i dettagli strutturali, è necessario l'aumento di 100x.

Prima di passare al bersaglio 100x, viene posizionata una goccia di olio di immersione sulle copertine, proprio dove si desidera osservare, e successivamente il revolver per microscopi si sposta per individuare il bersaglio 100x nella preparazione nella preparazione.

L'intensità della luce è regolata (aumenta) (spostando il condensatore e aprire il diaframma). Quindi, con piccoli movimenti che vengono dati alla vite micrometrica (in avanti o indietro) dovrebbe concentrarsi perfettamente se il microscopio utilizza obiettivi paraffocali.

Se si tenta di focalizzare la preparazione direttamente con l'obiettivo di immersione, potresti avere problemi a trovare l'approccio. Non è un'azione impossibile, ma la difficoltà aumenta in modo significativo.

Cura

Per usare l'olio di immersione, devono essere prese in considerazione determinate condizioni.

Può servirti: flora e fauna della regione andina: specie rappresentative

Quando è stata eseguita una preparazione colorata, come un RUBB. Altrimenti, l'olio insieme all'acqua formerà micelle che non permetteranno alla preparazione di visualizzare.

D'altra parte, dopo aver osservato il lotto dei preparativi, cioè alla fine della giornata lavorativa, l'obiettivo 100x deve essere accuratamente pulito, usando un documento per le lenti con etanolo. Se la lente sporca viene lasciata, l'olio si asciugherà e quindi sarà molto difficile rimuoverlo, danneggiando il campo di visualizzazione.

Allo stesso modo, dobbiamo tenere presente che l'olio è infiammabile e deve essere lontano dalle fonti di calore (accendini). È importante evitare di riscaldarlo sopra i 65 ° C.

Infine, l'olio è un prodotto tossico. Pertanto, il contatto diretto con la pelle e le mucose, dove può causare lieve irritazione. Per evitare incidenti, si consiglia di utilizzare guanti e lenti di sicurezza per manipolarlo.

Nel caso in cui tu abbia un contatto con l'olio, l'area con molta acqua deve essere lavata. Se l'olio Spleng negli occhi, dovrebbe essere lavato allo stesso modo, mantenendo gli occhi aperti. In caso di ingestione accidentale, è importante mangiare acqua calda e indurre vomito, oltre ad andare dal medico più vicino.

Riferimenti

1. “Microscopio a fluorescenza per la riflessione interna totale." Wikipedia, Enciclopedia gratuita. 30 dicembre 2018, 22:46 UTC. 14 maggio 2019, 01:54
2. IVD. Olio di immersione a microscopia. Disponibile su: utenti/team/download.
3. Biologia ambientale e microbiologia. Gestione del microscopio ottico. Disponibile su: EUMED.Net/Libri.
4. Sánchez Lera Rita María, Oliva García Ninfa Rosa. Storia del microscopio e il suo impatto sulla microbiologia. Rev Hum Med, 2015; 15 (2): 355-372. Disponibile su: scielo.
5. Herrero J. Pratica n. 1: fondamentali e gestione del comune microscopio ottico. Università d'Alacant disponibile su: Rua.Ua.È/dspace
6. Scharlau - MSDS. Olio di immersione, per microscopia. 2001. Disponibile su: Input LabCentral.