Caratteristiche rosse del Congo, preparazione e applicazioni

Lui Congo rosso È un colorante azoico proteico, formato dall'accoppiamento di un sale di diazonio e un anello aromatico attivo. Questa sostanza è in grado di assorbire le radiazioni elettromagnetiche nello spettro visibile, motivo per cui presenta un colore intenso.

È caricato negativamente. Pertanto, ha un'affinità per i componenti cellulari caricati positivamente, come determinate sostanze proteiche. Il suo colore varia in base a pH. In questo senso, se il mezzo è acido (pH 5,2 il colore è rosso intenso.

Soluzione rossa disidratata e colloidale del Congo. Fonte: Pixinio.com e wikipedia.com

È una sostanza molto versatile, poiché ha più utilità. È stato usato come colorante nell'industria tessile e anche per cellule e tessuti.

Anche per eseguire mezzi di coltura che misurano l'azione enzimatica, come indicatore di pH, come sostanza di controllo nella valutazione del corretto funzionamento degli spettacoli, nello studio della formazione di biofille o nella diagnosi di amiloidi.

Allo stesso modo, ha permesso di distinguere sierotipi batterici e fungini mediante l'identificazione di strutture specifiche nella sua parete (lipopolisaccaridi).

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Caratteristiche del Red Congo

Questa sostanza fu scoperta da Böttiger nel 1884. È un derivato del diazonium formato dal bis-diazoico di Benchnine con acido naftionico. La molecola rossa del Congo misura 21 Armstrong e il peso molecolare è di circa 8000 g/mol.

Il Red del Congo è caratterizzato dall'essere solubile in acqua e ancora di più in solventi organici come l'etanolo, che formano una soluzione colloidale.

Ha un'affinità per la cellulosa, da parte del tessuto amiloide e da componenti cellulari caricati positivamente.

Preparazione

Il rosso Congo viene preparato a diverse concentrazioni a seconda della tecnica da utilizzare. La maggior parte utilizza il Red Congo all'1%, 2%, 0,1%, tra gli altri.

Ad esempio, per preparare il 2% del Congo, il Congo deve pesare 2 g di colorante disidratato e aggiungere 100 ml di acqua distillata. Quindi viene conservato in una bottiglia ambra.

Applicazioni

Come tintura nel settore tessile

Per un po 'è stato ampiamente utilizzato nell'industria tessile a causa della sua fissazione in cotone, ma attualmente è in disuso perché è cancerogeno e anche perché il colore non è stabile, scolorisce attraverso l'attrito.

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Determinazione della capacità di formazione dei biofilm

È stato dimostrato che la capacità di formazione del biofiller di microrganismo è un fattore di virulenza.

In questo senso, il colorante rosso Congo viene usato come metodo per determinare la formazione di biofilm. Il rosso Congo si lega agli esopolisaccaridi presenti nel biofilm. Tuttavia, rispetto ad altri metodi è il meno raccomandato dagli alti falsi negativi che si verificano.

Il metodo utilizza l'agar rosso Congo, questo è composto da agar nel sangue come base, glucosio (10 g/L) e colorante rosso Congo (0,4 g/L). I ceppi da valutare vengono seminati nel mezzo e vengono incubati per 24 ore a 37 ° C e successivamente incubati per 48 ore a temperatura ambiente.

Si osserva un test positivo se si osservano colonie cristalline di aspetto nero e secco.

Spettofotometri Controllo di qualità

Per valutare se l'assorbanza o l'elaborazione dell'attrezzatura di misurazione sta rispettando i parametri fotometrici stabiliti dalle normative internazionali, è possibile eseguire una semplice tecnica che consente di stabilire se i problemi delle apparecchiature si traducono all'interno degli intervalli di accettabilità.

Una delle tecniche di valutazione è l'uso di Red Congo, in base al punto isosbetico.

Si chiama punto isosbetico alla lunghezza d'onda a cui il Red Congo emette la stessa assorbanza indipendentemente dal pH, dalla concentrazione e dalla temperatura. Il valore di assorbanza è fisso e può essere utilizzato come riferimento.

È noto che il punto isosbhetico teorico del rosso Congo è 541 nm. Se il valore ottenuto è diverso, è noto che l'attrezzatura presenta problemi di spostamento della lunghezza d'onda e deve essere rivisto da un tecnico specializzato.

Preparazione dei media culturali

Ortiz e collaboratori descrivono un terreno di coltura preparato con colorazione rossa del Congo e carbossimetilcellulosa chiamato agar CMC, al fine di rilevare ceppi microbici di cellulite; Cioè, produttori cellulari (endogluconesi, exoglucanasi e ß-glucosidasi).

Questo mezzo ha una colorazione intensa. Il colore sarà dissipato dall'azione dell'enzima endoglucanasi che rompe la struttura del carbossimetilelulosio. Questo suggerisce una reazione positiva.

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La diminuzione della viscosità e dell'assorbanza consente la quantificazione dell'attività enzimatica. Ad esempio, in ceppi di Streptomyces sp.

Identificazione dei microrganismi

Il Red del Congo ha un'affinità per le strutture polisaccaride di alcuni ceppi, raggiungendo l'identificazione di questi microrganismi. Tra questi ci sono i Escherichia coli, e il Shigella flexneri.

Le piastre di agar rosso del Congo sono anche usate per ottenere colonie caratteristiche, come  Azospirillum sp, che dà colonie rosse scarlatte, tra l'altro.

Colorazione cellulare e tessuto

Una delle applicazioni più comuni di Red Congo è la sua utilità nella diagnosi di amiloidosi. Questa strana malattia consiste nell'accumulo extracellulare di una proteina anormale in vari organi. Questa proteina anomala è prodotta nel midollo osseo ed è chiamata amiloide.

Congo Red ha un'alta affinità per questa sostanza. Questa proprietà è stata usata per dimostrare la sua presenza nei tessuti istologici. Il rosso Congo viene utilizzato accanto all'ematossilina/eosina a questo scopo.

L'unione del tessuto amiloide e del rosso Congo viene data attraverso i legami idrogeno non polari, tra i gruppi carbossilici e il gruppo amminico. La proteina amiloide fornisce i gruppi carbossilici (COOH) e il Rosso Congo il gruppo amminico.

Il tessuto amiloide è colorato in varie tonalità che vanno dal rosa al rosso intenso visto al microscopio ottico. Nei microscopi con doppia luce polarizzata si osservano questi preparati con un birrefringnce patognomonico verde di mela.

Cioè, presentano il dicroismo, poiché le fibre amieloidee sono anisotropiche. Questa osservazione conferma la diagnosi.

La colorazione dei tessuti rossi del Congo è compatibile con altre metodologie diagnostiche, come i metodi immunocitochytici, essendo anche in grado di presolvere.

Come indicatore di pH

La proprietà di girare davanti alle variazioni di pH viene utilizzata dalla tecnica chiamata cromoendoscopia.

Questa tecnica utilizza da colorare e indicatori di pH che consentono di rilevare alcune patologie. Tra questi c'è l'uso di Red del Congo, che può rivelare i primi riflettori del cancro nella mucosa gastrica, utilizzato come marcatore di acidità.

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La tecnica si basa sul fatto che il rosso rosso è nero è nero. Pertanto, dopo aver messo una soluzione di Red Congo sulla mucosa gastrica, saranno scelte le aree in cui c'è palmente per prendere il campione per la biopsia, cioè dove non esiste una produzione acida. Ciò suggerisce la presenza di un focus canceroso o perdita di cellule parietali.

Riferimenti

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