Caratteristiche cromatografiche a strati fine, a cosa serve

IL Cromatografia a strato sottile È un metodo che consente la separazione e l'identificazione delle sostanze presenti in una miscela. Lo "strato fine" così chiamato è formato da gel di silice (ossido di silicio), allumina (ossido di alluminio) e cellulosa. Tuttavia, possono essere utilizzati altri preparativi per alcune applicazioni.

Sono usati come supporti a strato fine: fogli di vetro, alluminio o materiale plastico. Il materiale che forma lo strato fine funge da fase stazionaria della cromatografia, cioè quello che rimane fisso; mentre il solvente o la miscela di solventi usati costituiscono la fase mobile, che si muove con le sostanze da separare.

La cromatografia di carta è un tipo rudimentale di cromatografia a strato fine. Fonte: nessun autore leggibile da macchina fornita. Dubaj ~ Commonswiki assunto (basato su reclami di copyright). / Dominio pubblico

La cromatografia di carta è governata dallo stesso principio di cromatografia a strato fine. Il documento diventa la fase stazionaria "fine", la cui risoluzione non è paragonata a quella ottenuta usando le altre varianti di questa tecnica.

La distanza raggiunta dalle sostanze in una cromatografia a strato fine (vedi macchie colorate) dipende dalla polarità della fase stazionaria, dalla polarità del solvente (fase mobile) e dalla polarità delle sostanze.

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Caratteristiche della cromatografia a strato fine

Generalità

La cromatografia a strato fine è fondamentalmente un metodo analitico. Pertanto, vengono utilizzate quantità molto piccole di sostanze da analizzare.

I fogli di cromatografia a strato fine hanno un supporto rigido di materiale di vetro, alluminio o cellulosa, su cui è posizionato il materiale utilizzato per la fase stazionaria. Questo dipende dagli obiettivi da raggiungere con la cromatografia.

Tra i materiali utilizzati nella cromatografia a strato fine ci sono: silice silice o silice, allumina (ossido di alluminio), silicato di cellulosa o magnesio.

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La camera di cromatografia è costituita da un vaso precipitato o un cilindro di vetro, che viene posizionato un coperchio di vetro che chiude la telecamera in modo ermetico, evitando così la fuga dei vapori dei solventi utilizzati nella cromatografia.

Il foglio di cromatografia è posizionato verticalmente nella camera cromatografica, appoggiata sulla sua base. L'altezza dei solventi nella camera di cromatografia è di solito 1 cm.

Sviluppo

La cromatografia a strati fine è costituita da una fase stazionaria e una fase mobile. La fase stazionaria è il materiale utilizzato per eseguire la cromatografia, ad esempio il gel di silice. Questo materiale è polare e viene utilizzato, tra gli altri usi, nell'analisi di steroidi e aminoacidi.

La fase mobile è costituita da una miscela di solventi, di solito volatile e organica. Una miscela molto usata di solventi è quella di etil ed esano acetato.

Il solvente equivale a capillarità nella fase stazionaria, stabilendo una competizione tra le sostanze sottoposte alla cromatografia e i solventi della fase mobile per siti in fase stazionaria.

Se la fase di sillaba in gel sillico (polare) viene utilizzata come fase stazionaria, le sostanze polari interagiscono con esso e raggiungono un piccolo spostamento durante la cromatografia. Nel frattempo, le sostanze non polari avranno uno spostamento molto maggiore durante la cromatografia non interagendo efficacemente con la silice di gel.

Rivelato e analisi del risultato

La cromatografia è completata quando il solvente raggiunge un'altezza appropriata che non raggiunge l'altezza del foglio cromatografico. Il foglio di cromatografia da camera viene rimosso e la parte anteriore del solvente è contrassegnata con una linea.

La posizione delle sostanze nella cromatografia a strato fine può essere visualizzata con diversi metodi, tra cui la visualizzazione diretta con luce ultravioletta, l'uso della luce ultravioletta nei fogli trattati con fosforo o la presentazione di fogli con vapori di iodio, ecc.

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Nell'identificazione e nella caratterizzazione delle diverse sostanze viene utilizzato il fattore di ritenzione così chiamato (RF). RF = distanza raggiunta da una sostanza / distanza raggiunta dal solvente.

Il valore di RF è tipico di ciascuna sostanza per una certa miscela di solventi della fase mobile, nonché il tipo di fase stazionaria.

A cosa serve cromatografia a strati fine?

La cromatografia a strato fine serve a identificare le diverse sostanze che fanno parte di una miscela. Ad esempio: puoi conoscere gli aminoacidi liberi presenti nel latte o in altro materiale.

La cromatografia a strato fine può identificare il tipo di lipidi presenti in un cibo. È inoltre usato per conoscere il grado di sviluppo di una reazione di chimica organica, stabilendo la presenza di reagenti e prodotti in diverse fasi della cromatografia.

Procedura

Primo passo

La miscela di solventi è posizionata nella camera di cromatografia, usando un volume in modo tale che la sua altezza raggiunga circa 1 cm.

Secondo passo

È conveniente prima di iniziare la cromatografia, chiudere strettamente la fotocamera e lasciare che i vapori dei solventi lo saturi.

Terzo passo

Una linea viene realizzata con una matita di grafite ad un'altezza di 1.5 cm da un'estremità del foglio di cromatografia. I campioni da utilizzare in cromatografia sono posizionati sulla linea dal capillare di vetro.

Quarto passo

Successivamente, il foglio di cromatografia con i campioni da analizzare viene posizionato nella fotocamera e chiude questo con il posizionamento del coperchio di vetro.

Quinto passo

L'ascesa della miscela di solvente viene osservata fino a quando la parte anteriore del solvente raggiunge un'altezza di circa 2 cm inferiore al foglio di cromatografia. Quindi, il foglio di cromatografia da camera viene estratto e la parte anteriore del solvente con una linea viene contrassegnata in esso.

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Sesto passo

Il foglio viene posto in una stufa per l'essiccazione e le sostanze presenti nella cromatografia vengono analizzate utilizzando un metodo di visualizzazione generale o uno specifico per il materiale cromatografico.

Settimo passaggio

I valori RF sono ottenuti per le diverse sostanze presenti e basate su controlli cromatografici, nonché sulla bibliografia in questo senso, viene identificata l'identificazione delle sostanze.

Nel seguente video, ciò che ha spiegato qui è riassunto in modo semplice:

Applicazioni

La cromatografia a strato fine consente di eseguire la seguente analisi:

-Componenti di un farmaco

-Presenza di diversi metaboliti nei fluidi corporei

-Determinazione della purezza di una sostanza specifica

-Colorare, aroma e dolcificanti identificazione nell'industria alimentare

-Determinazione dello stato di sviluppo di una reazione di chimica organica

Lo sviluppo del metodo HPTLC (cromatografia a strato fine delle prestazioni fine) ha notevolmente aumentato il potenziale della cromatografia a strati fine automatizzando il suo uso. Ad esempio: nel posizionamento del campione, del suo sviluppo e dell'analisi.

Ciò ha trasformato HPTLC in uno dei metodi più utilizzati nell'analisi effettuata nelle aree del farmaceutico, della biochimica, della cosmetologia, del cibo, dei farmaci e dell'ambiente.

Riferimenti

1. Whitten, Davis, Peck e Stanley. (2008). Chimica. (8 ° ed.). Apprendimento del Cengage.
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5. Attimarad, m., Ahmed, k. K., Aldhubaib, b. E., & Harsha, s. (2011). Cromatografia a strato sottile ad alte prestazioni: una potente tecnica analitica nella scoperta di farmaci farmaceutici. Metodi farmaceutici, 2(2), 71-75. doi.org/10.4103/2229-4708.84436
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