Agar trittico di soia

Lui Agar trittico di soia È un mezzo di coltura solido, non selettivo e nutriente. È designato con le lettere TSA) sono agar. È composto da tripteina, peptone di soia, cloruro di sodio e agar -agar.

A causa del suo alto potere nutrizionale è l'ideale per la coltivazione di microrganismi moderatamente impegnativi e non demandanti. Il mezzo senza supplementi aggiuntivi non è raccomandato per le colture primarie, ma è molto utile per aumentare i ceppi puri e mantenerli vitali, tra gli altri usi.

Inoltre, questo agar funge da base per la preparazione di media arricchiti come l'agar del sangue, specialmente quando è necessario Streptococcus pneumoniae E Streptococcus pyogenes rispettivamente.

D'altra parte, se combinato con antibiotici è utile per isolare i microrganismi anaerobici opzionali e rigorosi di importanza clinica dai campioni con flora mista.

Infine, la composizione dell'agenzia di soia Triptyse e la sua performance soddisfa le richieste stabilite dai diversi farmacopoi (europei, giapponesi e nordamericani).

Base

Per il buon sviluppo dei batteri, è necessaria la presenza di contributi energetici, come aminoacidi, vitamine, basi puiche e pirimidica.

In questo senso, la tripteina e il peptone di soia forniscono questi nutrienti ai microrganismi, permettendo così il loro pieno sviluppo. Tuttavia, per i batteri esigenti è necessario integrare questo sangue agitato o sangue riscaldato per aumentare il suo arricchimento.

D'altra parte, se gli antibiotici vengono aggiunti all'ambiente, diventa un mezzo selettivo. Puoi anche aggiungere 0.6 % di estratto di lievito per favorire l'isolamento delle specie del genere Listeria, mentre l'aggregato di Cistina Telurito E Il sangue di agnello è l'ideale per Corynebacterium difteriae.

Infine, il cloruro di sodio fornisce l'equilibrio medio osmotico e l'agar fornisce una solida consistenza.

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Preparazione

Piatti agricoli a triptyse soia

Per preparare l'agricoltica trittica di soia, 40 gr di mezzo commerciale disidratato devono essere ponderati in equilibrio digitale. Si dissolve in un litro di acqua distillata contenuta in un Felola.

La miscela viene lasciata a riposo per 5 minuti e successivamente prende una fonte di calore per aiutare la dissoluzione media. Deve essere agitato frequentemente e bollire per 1 o 2 minuti. Successivamente, il mezzo viene sterilizzato nell'autoclave a 121 ° C per 15 minuti.

Lasciare raffreddare fino a 50 ° C e distribuire in piastre sterili di Petri. Lascia che solidificare, investire, ordinare in piastrine e salvare in frigorifero.

Il pH finale del mezzo deve essere a 7,3 ± 0,2.

Va in considerazione che il colore della coltura disidratata è chiaro e dovrebbe essere immagazzinato tra 10 e 35 ° C, in un luogo asciutto.

Da parte sua, l'agar preparato è leggero ambra. Le piastre preparate devono essere conservate in frigo (da 2 a 8 ° C) fino all'uso.

Le piastre devono raggiungere la temperatura ambiente prima di essere utilizzate.

Piatti tripti agenti sommersi di soia con sangue

L'agar nel sangue sta preparando il sangue defibrato al 5% quando si raffreddano l'agar trittico di soia a 50 ° C. La miscela è omogeneizzata ruotando con movimenti morbidi.

Servire su piastre sterili di Petri. Il colore del mezzo deve essere la ciliegia rossa.

Piastre trittiche supplete di soia con sangue riscaldato

Per preparare l'agar sangue con TSA, le procedure già descritte, ma quando si lascia l'autoclave è consentito stare fino a quando la temperatura del mezzo è approssimativamente tra 56 e 70 ° C. A quel tempo il sangue viene posizionato e miscelato fino a quando il medio diventa colore marrone.

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Servire in piastre sterili di Petri. Il colore del mezzo è marrone marrone.

Spicchi di soia triptica agrico

La procedura di preparazione dell'agar è uguale a quella descritta per le piastre, con la differenza che invece di servire il mezzo su piastre di Petri, è distribuita tra 10 e 12 ml in tubi con coperchio baquelite prima di sterilizzare.

Successivamente, i tubi vengono autoclavati a 121 ° C per 15 minuti. Quando lasciano inclinarsi con l'aiuto di un supporto e lasciarsi consolidare.

I cunei preparati vengono seminati in superficie e servono a mantenere determinati microrganismi vitali non demanding, per un certo tempo.

Applicazioni

L'agar trittico di soia viene utilizzato nei seguenti casi:

-Come base per preparare l'agar di sangue classico che viene utilizzato nella routine nella maggior parte dei laboratori.

-Isolamento di batteri esigenti.

-Osservazione del modello di emolisi.

-Esecuzione di test diagnostici.

-Come base per preparare sangue speciale a Corynebacterium difteriae, Con Telurito cistina E sangue di agnello.

-Come base per preparare il sangue di agnello, più kanamicina-vancomicina per la crescita anaerobica, in particolare Bacteroides sp.

-Per il mantenimento di ceppi non demanding (Bacteroteca).

-Conteggio microbico aerobico nel limite microbico Studio di campioni di acqua, ambiente, cibo e cosmetici.

Seminato

I campioni possono essere seminati direttamente sulla superficie dell'agar trittico integrato con il sangue o altri additivi. È seminato con stanchezza.

Mentre le piastre di agar a trittico additive di soia sono generalmente usate per aumentare i ceppi microbici (batteri o lieviti).

QA

Controllo della sterilità

Per verificare la sterilità dei diversi media preparati con la soia tripicaseína, è raccomandato. In tutti i casi deve rimanere senza crescita.

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Se viene verificata la contaminazione, il lotto completo deve essere scartato.

Controllo della crescita

Per studiare il corretto funzionamento dell'agar trittico di soia, è possibile utilizzare i seguenti ceppi batterici: Escherichia coli ATCC 8739, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Pseudomonas aerugiosa ATCC 9027 e Enterococcus faecalis ATCC 29212.

I ceppi vengono seminati e incubati in aerobiosi a 37 ° C per 24 ore.

In tutti i casi la crescita deve essere soddisfacente.

Puoi anche usare funghi come complessi Candida albicans ATCC 10231 e Aspergillus Niger ATCC 16404. È prevista una buona crescita per entrambi i ceppi.

Controllo della crescita e modello di emolisi dell'agar trittico sommerso dalla soia con sangue

Per verificare il corretto funzionamento dell'agar sangue preparato con questa base è possibile utilizzare i seguenti ceppi: Streptococcus pyogenes ATCC 19615, Streptococcus pneumoniae ATCC 6305 e Streptococcus pneumoniae ATCC 49619.

Vengono seminati e incubati a 37 ° C in microaerofilia per 24 ore.

In tutti i casi la crescita deve essere soddisfacente, tenendo conto di ciò S. Pyogenes Beta-emolisi (alone chiaro intorno alla colonia) e in entrambi i ceppi di S. pneumoniae L'emolisi alfa (alone verdastro intorno alle colonie) dovrebbe essere osservata.

Riferimenti

1. Tripteína SOA Agar. Disponibile su: Britaniab.com
2. Agar di soia trittica. Disponibile su: sicurezza alimentare.Neogen.com