Cetima cetima cosa è, fondazione, preparazione, usi

Cetima cetima cosa è, fondazione, preparazione, usi

Lui Cetimida Agar o La cetrimide è un terreno di coltura solida selettiva, progettato per l'isolamento di Pseudomonas aeruginosa. Si basa sull'evidenziazione della produzione di pigmenti caratteristici di questa specie ed è stato elaborato dalla modifica dell'agar tecnologico, creata da King, Ward e Raney.

La formula originale conteneva sali di cloruro di magnesio, solfato di potassio, gelatina pancreatica e digestione agar-agar. La modifica della formula consisteva nell'aggregato di cetrimide.

Cetimida era d'accordo con Aeruginosa Pseudomonas

L'agar Cetrimarded è utile per lo studio microbiologico dei campioni in cui la presenza di Pseudomonas aeruginosa. Va notato che questo batterio è della massima importanza, perché sebbene faccia parte del normale microbiota ambientale, si comporta spesso come un patogeno opportunistico.

Pertanto, uno dei problemi più comuni originati da questo germe sono le infezioni nosocomiali, cioè quelle che si verificano all'interno dell'ambiente ospedaliero, attaccando i pazienti che hanno un sistema immunitario depresso.

D'altra parte, a causa dell'affinità che questo microrganismo ha con l'umidità, gli obiettivi di inquinamento più vulnerabili sono: attrezzature di respirazione assistita, farmaci, nebulizzatori, fonti d'acqua, condizionatori, disinfettanti, soluzioni iniettabili, soluzioni iniettabili, ferite aperte, cateteri, cateteri Sonde urinarie, tra gli altri.

In questo senso, l'agar chetimata è utile per i controlli microbiologici e le colture agli elementi precedentemente nominati.

Base

La cetrimenza si basa sulla capacità dei mezzi per favorire la crescita di P. Aeruginosa, stimolare la produzione dei loro pigmenti e a sua volta inibisce la crescita di altri microrganismi.

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Queste proprietà sono dovute alla funzione che ciascuno dei suoi componenti svolge. L'attuale peptone della gelatina funge da fonte di azoto, vitamine e minerali. La glicerolo o la glicerina funzionano come fonte di carbonio.

D'altra parte, cetrimide P. Aeruginosa, tra cui altre specie appartenenti allo stesso genere.

L'inibizione si verifica perché la ketramide agisce come un detergente cationico, che riesce a destabilizzare la membrana plasmatica della maggior parte dei batteri, ad eccezione di P. Aeruginosa e alcuni altri che riescono a sopravvivere.

D'altra parte, contiene cloruro di magnesio e solfato di potassio. Questi composti stimolano l'espressione fenotipica correlata alla capacità di Pseudomonas aeruginosa per produrre vari pigmenti, tra cui: piocianina, pioverdine, pirorbina, piomelanina e fluoresceina. Infine, contiene agar -agar, che ti dà la solida coerenza.

Interpretazione

L'interpretazione della crescita ottenuta in questo agar viene eseguita come segue:

L'osservazione di bordi rotondi, lisci e regolari, con produzione di pigmenti blu-verde, verde, marrone o rossastro, oltre all'emissione di odore di frutta (aminoacetofenone), è un risultato presuntivo della presenza di questo batterio in quel campione.

D'altra parte, è indicativo di P. Aeruginosa L'osservazione di un brillante pigmento giallo-verde sulle colonie quando la piastra è esposta alla luce ultravioletta.

Fluorescenza delle colonie di p. Aeruginosa in agar Cetimida sotto luce ultravioletta.

Va notato che ogni colore osservato è dovuto alla produzione di un pigmento specifico. The blue-greenish pigment corresponds to the production of piocyanine, the green to pioverdina, the reddish to piorrubin, the brown to piomelanine and the yellow-greenish fluorescence under the bright greenish light under the ultraviolet light to fluorescein.

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Preparazione

Pesare 43 gr di mezzo disidratato e dissolversi in acqua distillata. Aggiungi 10 ml di glicerolo. Porta la miscela a una fonte di calore. Lascialo bollire per alcuni minuti alla soluzione completa.

Autoclave a 121 ° C per 15 minuti. Lasciare riposare e servire su piastre sterili di Petri quando la temperatura è a circa 50 ° C.

Lascia che solidificare, investire, ordinare in piastrine e risparmiare in frigorifero fino all'uso. Per seminare le piastre di agar altezza, devono essere rimosse in anticipo e lasciarlo assumere la temperatura ambiente.

Il pH finale del mezzo deve essere a 7,2 ± 0,2.

Il colore del mezzo disidratato è beige e la preparazione è bianca opaca.

Applicazioni

Nell'agar chetimate, tutti i tipi di campioni possono essere seminati in cui la presenza di Pseudomonas aeruginosa. Pertanto, è utile in tutte le aree di microbiologia (ambientale, industriale, clinico, acqua e cibo).

È di grande importanza analizzare gli ambienti ospedalieri e quindi essere in grado di applicare i media correttivi, poiché questo microrganismo raggiunge i pazienti attraverso attrezzature, farmaci, soluzioni e forniture contaminate utilizzate dal paziente.

In questo modo, il microrganismo può infettare il tratto respiratorio inferiore, il tratto urinario e le lesioni dei pazienti immunosoppressi.

Puoi anche fare conteggi delle colonie P. Aeruginosa Nei test di limite microbici.

Seminato

L'agar cetimatato può essere usato come coltivazione primaria. La piastra è inoculata a uno dei suoi bordi e da lì è distribuita per esaurimento al resto della piastra. I campioni liquidi possono essere seminati in superficie con drigalski spatola.

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Le piastre sono incubate in aerobiosi a 37 ° C per 24 ore di incubazione.

Limitazioni

-Una piccola percentuale di ceppi di  Pseudomonas aeruginosa Non produrre piocianina, quindi può essere interpretato un falso negativo.

-Alcune specie di pseudomonas di importanza clinica sono inibite in questo mezzo.

-Nonostante osservi le caratteristiche descritte Pseudomonas aeruginosa, Devono essere corroborati con ulteriori test di identificazione. Un saggio che non dovrebbe mancare è il test dell'ossidasi, deve dare positivo.

-Alcuni enterobatteri possono crescere in questo mezzo e sviluppare un pigmento giallo, ma differiscono da Pseudomonas aeruginosa In questo quando si invia la piastra alla luce ultravioletta non c'è fluorescenza.

-Serratia marcescens riesce a sviluppare e produrre un pigmento rosa.

-Se le piastre di agar di cetrimide sono esposte per un po 'a temperatura ambiente, i ceppi di P. Aeruginosa Possono perdere la fluorescenza osservata alla luce ultravioletta, tuttavia la proprietà viene recuperata se viene incubata a 37 ° C.

QA

Per analizzare il corretto funzionamento dell'agar percolato, è possibile utilizzare i controlli, come ad esempio: Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Stenotrophomonas maltofilia ATCC 13637, Escherichia coli ATCC 25922 e Staphylococcus aureus ATCC 25923.

I risultati previsti sono:

  • Per P. Aeruginosa Buona crescita, con pigmento blu-verde e fluoresceina positiva.
  • S. Maltofilia E S. aureola Saranno parzialmente inibiti.
  • Ci si aspetta Escherichia coli essere completamente inibito.

Riferimenti

  1. Britania Laboratories. Head Cetrimida. Disponibile su: Britaniab.com
  2. Laboratori BD. Agar pseudosel BD (agar di cetrimide). Disponibile su: BD.com