Bilis Agarc

Lui Bilis Agulina È un mezzo di coltura solida selettiva e differenziale. Viene usato come test diagnostico per determinare la capacità di un certo microrganismo di crescere in un mezzo che contiene bile e decomponendo anche la sculina glicosidica in sculptina e glucosio.

Questo test diagnostico viene utilizzato per differenziare le specie dal genere Streptococcus appartenente al gruppo D (bile scultura positiva), da altri gruppi di streptococco che reagiscono negativamente davanti a questo test.

Piastra bilis bilis, sembrata con una deformazione enterococcus (test positivo). Fonte: nessun autore leggibile da macchina fornita. Philippinjl ha assunto (basato su reclami di copyright). [Dominio pubblico]

Va notato che alcuni streptococcus del gruppo Viridans possono idrolizzare.

D'altra parte, la bile medio è utile anche per la diagnosi di Listeria monocytogenes o specie di Aerococcus sp, Poiché questi microrganismi sono bile sculture positive.

L'agar biliare scolpito è composto da peptone, estratto di carne, biliare di bue, scultura, citrato di ferro, agar e acqua distillata. Alcune case commerciali includono il sodio azida all'interno della composizione del mezzo.

Il mezzo può essere preparato in laboratorio se si hanno tutti i composti separatamente o possono essere preparati dall'ambiente disidratato commerciale.

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Base

Il mezzo sculpton contiene peptone ed estratto di carne, entrambi i composti forniscono le sostanze nutrizionali necessarie per la crescita dei microrganismi.

Contiene anche la sculca; Questo composto è un glucóside formato dall'unione di un semplice monosaccaride (glucosio) con un composto chiamato legame 6.7-diidrossimarina o scoprido (agluconone), insieme a un legame acetale o glucosidico.

Il test si basa sulla dimostrazione se i batteri sono in grado di idrolide. Se ciò si verifica lo scultura viene suddiviso in scups e glucosio. La sculetina reagisce con il ferro presente nel mezzo, formando un composto marrone scuro e quasi nero.

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Ciò significa che il citrato ferrico funge da sviluppatore di reazioni. Questa funzione rende la scultura dell'agar biliare un mezzo differenziale.

D'altra parte, la bile è un inibitore che impedisce la crescita di alcuni microrganismi, pertanto i batteri prima di svolgere la scullina devono essere in grado di crescere in presenza di bile. Pertanto, questo mezzo è considerato selettivo.

I batteri che possono svilupparsi in questo ambiente sono principalmente quelli che vivono nell'ambiente intestinale.

In questo senso, alcune case commerciali si aggiungono al mezzo azide di sodio per inibire ulteriormente la crescita dei bacili gram negativi, aumentando la selettività del mezzo per la crescita dello streptococcus.

Infine, l'agar dà la solida consistenza all'ambiente e l'acqua è il solvente dei composti.

Preparazione

Preparazione della scultura biliare fatta in casa

Pesare:

5 g di peptones

3 g di estratto di carne

40 g di bile di bue

1 g di scolpito

0,5 gr di citrato di ferro

15 g di agar

1000 ml di acqua distillata

In caso di aggiunta di sodio azido.

Sciogliere i componenti nel litro di acqua distillata, scaldare fino a quando i composti si dissolvono nella sua interezza. Distribuire 5 ml in provette con coperchio filettatura da 16 x 125 mm. Autoclavar a 121 ° C, 15 libbre per 15 minuti.

Togliere dall'autoclave e inclinarsi i tubi su un supporto, in modo che l'agar si solidifica in un ampio picco di flauto.

Mantieni il frigorifero fino all'uso. Portare a temperatura ambiente prima di seminare.

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Puoi anche preparare piastre di sculture bile di bile; In questo caso, l'intera miscela è autoclava in una Felola e successivamente distribuita in piastre sterili di Petri. Si lasciano consolidare e tenerli in frigorifero.

Il pH medio deve essere 6.6 ± 0,2.

Preparazione della Bilis Agulina da un media commerciale

Pesare la quantità specificata dall'inserto. Questo può variare da una casa commerciale all'altra. Successivamente, procedere uguale alla procedura spiegata sopra.

Il pH medio deve essere 6,6 ± 0,2. Il colore del mezzo disidratato è beige leggero e il mezzo preparato è ambra scura.

SCULPPITTO COMMERCIONE MEZZO BILE. Fonte: foto scattata dall'autore MSC. Marielsa Gil.

Applicazioni

Il mezzo sculptico viene utilizzato principalmente per differenziare lo streptococcus del gruppo D (bile di scultura positiva), dal resto dei gruppi di streptococco (bile di scultura negativa).

Se il test di crescita è combinato in brodo ipersalizzato con il test della bile scolpita, è possibile identificare l'identificazione di uno speciale gruppo di streptococcus di gruppo D chiamato enterococcus.

Questo speciale gruppo Streptococcus appartiene al gruppo D del genere menzionato e è in grado di idrolizzare il 6,5%di sodio), proprietà che fa la differenza.

Pertanto, lo streptococco che idrolizzato.

Seminato

Inoculare il mezzo preferibilmente da un brodo puro di 24 ore di Todd-Hewitt.

Aggiungi 2 gocce sulla superficie media con una pipetta Pasteur ed estendi nel mezzo con una maniglia di platino.

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Incubare a 35 ° C per 48 ore, mentre il tempo di incubazione è soddisfatto, può essere monitorato per vedere se c'è una reazione positiva. Se alla fine della reazione rimane negativa può essere incubata fino al completamento di 72 ore.

Interpretazione

Reazione positiva: Aspetto di un colore marrone scuro, quasi nero nel picco del flauto (in caso di test del tubo) o blabero dell'agar intorno alle colonie (in caso di test della piastra).

Reazione negativa: Non c'è anneri del mezzo o c'è l'aspetto del colore nero in meno della metà del tubo dopo 72 ore di incubazione. D'altra parte, la crescita batterica nel mezzo senza l'apparizione del colore nero dovrebbe essere considerata un test negativo.

QA

Per valutare la qualità del mezzo, una tensione di Enterococcus faecalis ATCC 29212 come controllo positivo e una deformazione di streptococus non appartenente al gruppo D come controllo negativo.

Limitazioni

-I media che non contengono azide di sodio consentono la crescita dei bacilli Gram negativi. Alcuni di essi possono bloccare il mezzo.

- Alcune case commerciali aggiungono una bassa concentrazione biliare (10%) e per questo motivo alcuni streptococco che non appartengono al gruppo D possono svilupparsi nell'ambiente e idrolizzare la sculina, che può generare errori nell'interpretazione.

Riferimenti

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