Baird Parker Agar What Is, Foundation, Preparazione, Use

Lui Baird Parker Agar o l'agar tuorlo d'uovo è un mezzo di coltura solido, selettivo e differenziale. È stato creato nel 1962 per il rilevamento e il conteggio della coagulasi positiva stafilococchi (Staphylococcus aureus).

È composto da caseina pancreatica idrolizzata, estratto di carne, estratto di lievito, cloruro di litio, glicina, piruvato di sodio, telurite di potassio, presa e emulsione del tuorlo d'uovo.

Colonie tipiche di Staphylococcus aureus nell'invecchiamento di Baird Parker. Fonte: Daizy John [CC di 4.0 (https: // creativeCommons.Org/licenze/by/4.0)]

Baird Parker Agar si basa sulla capacità del S. aureola per ridurre il teluido e produrre lecitinasi. Entrambe le proprietà generano una colonia con caratteristiche specifiche per questa specie. Pertanto, fornisce una grande efficacia nel rilevamento di questo microrganismo.

Le colonie tipiche di S. aureola Sono neri o grigio scuro, con bordo incolore e un alone chiaro che li circonda, differenziando dal resto dei microrganismi. Questo patogeno può essere trovato in campioni clinici, acque, cosmetici e cibi crudi o cotti.

La sua diagnosi o rilevazione è della massima importanza, a causa della varietà di patologie che produce, come avvelenamento alimentare, sindrome della pelle scottata, sindrome da shock tossico, ascessi, meningite, setticemia, endocardite, tra gli altri.

Base

Potere nutrizionale

Caseina idrolizzata pancreatica, estratto di carne ed estratto di lievito sono le fonti di nutrienti, vitamine e minerali necessari per lo sviluppo generale microbico, mentre il piruvato e la glicina sono composti che favoriscono la crescita specifica di Staphylococcus aureus.

Selettivo

L'agar Baird Parker è selettivo perché contiene sostanze che inibiscono la crescita della flora di accompagnamento, favorendo lo sviluppo di S. aureola. I composti inibitori sono cloruro di litio e tellurite di potassio.

Differenziale

Questo mezzo consente di differenziare il S. aureola del resto della coagulasi negativa stafilococchi. S. aureola Ha la capacità di ridurre la telurite a teluro metallico nero, formando colonie nera o grigio scuro.

Allo stesso modo, il tuorlo d'uovo fornisce i substrati per dimostrare la presenza dell'enzima di lectinasi e lipasa. S. aureola È una lecitinasi positiva e quindi verrà osservato un alone chiaro attorno alla colonia, indicando che la lecitina è stata idrolizzata.

Può servirti: Gill Breathing: come è fatto e esempi

In questo senso, l'aspetto in questo colon nero o luminoso nero o grigio S. aureola. 

Se si forma una zona di precipitazione, è indicativo che esiste attività della lipasi. Alcuni ceppi di S. aureola Sono positivi e altra lipasi negativa.

Nel caso in cui il S. aureola Sii una lipasi positiva che verrà osservata un'area opaca attorno alla colonia nera o grigio scuro, quindi l'alone chiaro per l'azione della lecitinasi.

Le colonie di batteri diverse da S. aureola Capace di crescere in questo mezzo svilupperanno colonie incolore o marrone, senza alone in giro.

Puoi anche osservare colonie nere atipiche con o senza bordo incolore, ma senza alone leggero. Queste colonie non dovrebbero essere prese in considerazione, non corrispondono S. aureola.

Preparazione

Emulsione del tuorlo d'uovo

Viene preso un bel uovo di gallina, vagando bene e collocato da 2 a 3 ore nel 70% di alcol. Quindi, l'uovo si apre asettico e con cura separa il luminoso del tuorlo. Successivamente, 50 ml del tuorlo vengono presi e miscelati con 50 ml di soluzione fisiologica sterile.

1% P/V Potassio Telltto

Alcune case commerciali vendono l'1% di poetassio Teluro pronto all'uso. Viene aggiunto al mezzo prima che i mezzi si solidificino.

Per preparare questa soluzione in laboratorio, 1.0 gr di tellurite di potassio e si dissolve in una parte dell'acqua. Successivamente la quantità di acqua viene completata fino a quando non raggiunge 100 ml. La soluzione deve essere sterilizzata con il metodo di filtrazione.

Preparazione del terreno di coltura

Pesare 60 gr di mezzo disidratato e dissolversi in 940 ml di acqua distillata. Lasciare la miscela a riposo per circa 10-10 minuti.

Può servirti: relazioni interspecifiche: tipi ed esempi

Applicare frequentemente l'ambiente mescolando l'ambiente per migliorare il processo di dissoluzione. Lascia bollire per un minuto. Sterilice in autoclave a 121 ° C per 15 minuti.

Lasciare riposare fino a raggiungere una temperatura di 45 ° C e aggiungere 50 ml di emulsione del tuorlo d'uovo e 10 ml di telurite all'1%. Mescolare bene e servire tra 15 e 20 ml su piastre sterili di Petri.

Lasciare solidificare, ordinare in un invertito in piastre e risparmiare in frigorifero fino a utilizzare.

Il pH finale del mezzo preparato deve essere 6,8 ± 0,2.

Prima di seminare un campione, è necessario attendere che la piastra prenda la temperatura dell'ambiente. Soffiare le targhe dovute a colpi o superficie piantati con drigalski spatola.

Il colore del mezzo disidratato viene arrostito e il colore del mezzo preparato è ambra chiaro.

Utilizzo

Campioni clinici

I campioni clinici vengono seminati direttamente scaricando parte del materiale a un'estremità della piastra e da lì si sono distinti a causa dell'esaurimento. Incubare per 24-48 ore a 35-37 ° C.

Campioni di cibo

Pesare 10 gr del campione alimentare e omogeneizzare in 90 ml di acqua di peptonada allo 0,1%, da lì preparano diluizioni se necessario. Inoculare le placche in triplice. È incuba per 24-48 ore a 35-37 ° C.

Questa metodologia consente di contare le colonie tipiche ottenute ed è ideale quando la presenza di S. aureola Sopra 10 UFC per GR/ML campione.

Se si sospetta che la quantità di S. aureola È piccolo o c'è molta flora di accompagnamento, è suggerito. Questo favorirà la crescita di S. aureola e inibire lo sviluppo della flora di accompagnamento. I tubi del ciuffo saranno seminati in Baird Parker Agar.

Può servirti: come sono distinti gli organismi viventi dal nostro ambiente?

Campioni d'acqua

In un sistema di filtrazione a vuoto e sterilizzato, vengono filtrati 100 ml di acqua in studio, quindi la membrana microporosa da 0,4 micron viene rimossa con un morsetto sterile e posizionata su una piastra Baird Parker. È incuba per 24-48 ore a 35-37 ° C. Questa tecnica consente alle colonie tipiche di contare S. aureola.

QA

Per valutare la qualità dell'agar Baird Parker, è possibile utilizzare ceppi noti, come ad esempio Staphylococcus aureus ATCC 25923, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Staphylococcus epidermidis ATCC 12228, Escherichia coli ATCC 25922 O Proteus mirabilis ATCC 43071.

Nel caso dei ceppi di S. aureola L'ATCC è noto per ridurre la terite e sono lipasi positive e lecitinasi. Pertanto, ci deve essere uno sviluppo soddisfacente e far crescere colonie convesse con centro nero e bordo incolore, con un alone opaco e un'altra alone più esterna Clear.

Da parte sua, di S. epidermidis Si prevede un cattivo sviluppo in questo mezzo, con colonie grigie che ormeggiano in nero, senza un alone chiaro.

Per E. coli E P. Mirabilis Si prevede che sia totalmente o parzialmente inibito. In caso di coltivazione di colonie marroni senza zona opaca o aureola chiara.

Raccomandazioni

-Il mezzo non deve essere riscaldato dopo aver aggiunto il tuorlo di telurito e uova.

-La preparazione dell'emulsione del tuorlo d'uovo e il suo aggregato nel mezzo è una fase di contaminazione molto vulnerabile. È necessario fare attenzione.

-Se esiste una presenza di colonie tipiche di S. aureola Deve essere corroborato guidando un test di coagulasi per detto deformazione.

-Se ci sono risultati dubbi con la coagulasi, devono essere montati altri test di conferma.

-Fare attenzione a non confondere la presenza di colonie tipiche di S. aureola Con le colonie nere atipiche.

Riferimenti

1. Laboratori BD. Baird Parker Agar. Disponibile su: BD.com
2. Laboratori Francisco Soria Melguizo. Baird Parker Agar. Disponibile su: http: // f-soria.È/informare